 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1831 | 回復(fù): 9 | ||
[求助]
這個大峰是溶劑峰嗎，為什么會這么的大？請教大家！
|
|
這個超大的峰難道是傳說中的溶劑峰或鬼峰嗎！？？ 小弟做的實驗主要是測酶活和抑制劑對酶的抑制效果，流動相：0.8%乙腈，20mM三乙胺，用醋酸調(diào)PH到6.0，波長259nm。 第一天測的樣品很正常，幾個峰都能分開，產(chǎn)物出峰時間在6.3min左右。 但是第二天，在酶反應(yīng)體系中加入了極少量的DMSO后，就在3.3min左右出現(xiàn)了一個非常大的峰，很怪異！我測過，DMSO在259nm波長處基本上是無吸收的，我重復(fù)了很多次，這個峰一直都出現(xiàn)。 這個突然出現(xiàn)的大峰是溶劑峰嗎，為什么會這么的大，這個峰的出現(xiàn)導(dǎo)致我的檢測的結(jié)果很不準(zhǔn)確，產(chǎn)物出的峰都成山丘一樣凸起來的了，根本就不是尖的，大伙幫我看看是怎么回事吧。 [ Last edited by yzhlasiI on 2011-5-26 at 18:23 ] |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
278求調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
297求調(diào)劑
已經(jīng)有12人回復(fù)
-
0703化學(xué)297求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
材料學(xué)碩301分求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
280求調(diào)劑
已經(jīng)有11人回復(fù)
-
311求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
313求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
317求調(diào)劑
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
307求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 流動相不變，樣品濃度不變，溶劑改變，峰面積會改變嗎？
已經(jīng)有17人回復(fù)
- HPLC 最前面出的溶劑峰接到里面會影響核磁打譜嗎？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助】關(guān)于HPLC的溶劑峰時有時無，時大時小的問題
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【求助】HPLC兩分鐘左右出峰一定是溶劑峰嗎？
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 【求助】請教：核磁共振，溶劑峰問題？
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 溶劑峰空白溶劑中和進(jìn)樣品后面積大不一樣，后者是前者的10倍左右
已經(jīng)有1人回復(fù)
- 【交流】玻碳電極放在空白溶液中掃會出峰，并且峰很大，怎么回事啊！
已經(jīng)有9人回復(fù)
xiaoxiao270
至尊木蟲 (著名寫手)
- PhEPI: 8
- 應(yīng)助: 137 (高中生)
- 貴賓: 1.744
- 金幣: 11275.8
- 散金: 7133
- 紅花: 143
- 帖子: 2589
- 在線: 431.1小時
- 蟲號: 1132172
- 注冊: 2010-10-26
- 性別: GG
- 專業(yè): 天然藥物化學(xué)
2樓2011-05-26 22:38:23
癡夷子皮
版主 (文壇精英)
老痞
- PhEPI: 10
- 應(yīng)助: 2016 (講師)
- 貴賓: 5.368
- 金幣: 54487.3
- 散金: 41688
- 紅花: 303
- 沙發(fā): 1206
- 帖子: 32611
- 在線: 4303.7小時
- 蟲號: 674536
- 注冊: 2008-12-14
- 性別: GG
- 專業(yè): 無神論
- 管轄: 人文社科
DMSO有時候基線不太好，但不會出現(xiàn)這樣的溶劑峰。俺270nm液相DMSO無問題。 3樓2011-05-26 22:42:32
癡夷子皮
版主 (文壇精英)
老痞
- PhEPI: 10
- 應(yīng)助: 2016 (講師)
- 貴賓: 5.368
- 金幣: 54487.3
- 散金: 41688
- 紅花: 303
- 沙發(fā): 1206
- 帖子: 32611
- 在線: 4303.7小時
- 蟲號: 674536
- 注冊: 2008-12-14
- 性別: GG
- 專業(yè): 無神論
- 管轄: 人文社科
4樓2011-05-26 22:45:33
yangqiang10
金蟲 (正式寫手)
林風(fēng)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 792.6
- 散金: 18
- 帖子: 656
- 在線: 71.3小時
- 蟲號: 1012729
- 注冊: 2010-05-06
- 性別: GG
- 專業(yè): 藥劑學(xué)
5樓2011-05-26 23:09:21
破土草兒
木蟲 (正式寫手)
- PhEPI: 9
- 應(yīng)助: 11 (小學(xué)生)
- 貴賓: 0.08
- 金幣: 2018.7
- 散金: 138
- 紅花: 10
- 帖子: 499
- 在線: 324.7小時
- 蟲號: 1248703
- 注冊: 2011-03-29
- 性別: GG
- 專業(yè): 中藥藥代動力學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
yzhlasiI(金幣+1): 非常感謝！ 2011-05-27 17:34:16
| 絕對不是溶劑峰，溶劑峰有一個特點，峰頂像“掃把"一樣一樣不規(guī)則！按照你的描述，結(jié)合圖，我來解釋你的反應(yīng)的現(xiàn)象。圖一中峰1、2是酶反應(yīng)底物，1+2---->峰3，經(jīng)過一天之后，底物越來越少，都轉(zhuǎn)化為圖一中的峰3，峰3在反應(yīng)體系中，又不斷轉(zhuǎn)化為圖峰2的峰1產(chǎn)物（產(chǎn)物的量不斷增多）。從你以上圖片可以分析得到，反應(yīng)體系中各個產(chǎn)物的母核結(jié)構(gòu)變化不大（尤其圖一的峰3和圖二的峰1之間），只不過圖二的峰1產(chǎn)物的極性變大了！恭喜lZ，你這個發(fā)現(xiàn)可能就是一篇很好的paper。一個新的實驗發(fā)現(xiàn)！當(dāng)然不排除你實驗設(shè)計有不合理的地方，比如反應(yīng)體系不穩(wěn)定，導(dǎo)致反應(yīng)持續(xù)進(jìn)行，希望LZ好好研究！ |
6樓2011-05-26 23:18:07
7樓2011-05-27 00:16:20
|
這位兄臺說的有道理，我這個反應(yīng)體系確實是圖一中峰1、2是酶反應(yīng)底物，1+2---->峰3，但是反應(yīng)10分鐘后，我用沸水煮了10分鐘，使酶失活終止反應(yīng)了，所以按道理，這個反應(yīng)不能繼續(xù)進(jìn)行了。 關(guān)于圖2，為什么加DMSO,是因為我要加入酶抑制劑，看抑制劑的抑制效果，而那些小分子抑制劑都是溶解在DMSO里面的，加入DMSO或者抑制劑后，這個大峰就出現(xiàn)了。 這個問題我一直不知道是為什么，因為我換柱子后，這個大峰就消失了，我只能認(rèn)為是柱子的原因，因為我用的是伊力特C18的柱子，這個柱子的流動相里面有機相含量最好是不能少于10%的，而我的流動相里面的有機相幾乎為0，因為加入有機相后幾個峰會連在一起而分不開，所以只能減少有機相的含量，現(xiàn)在用的是安捷倫TC-C18(2)的柱子，流動相里面加入了5%的甲醇，雖然能做出來，但是重復(fù)性不是很好，我這個星期實驗了再和大家交流下啊。 |
8樓2011-05-27 17:34:38
|
這個實驗師兄以前做過了的，DMSO加入后不會出現(xiàn)那個奇怪的峰，而且DMSO也不會參與這個反應(yīng)啊，我是重復(fù)師兄以前做過的實驗，流動相和體系都是按照師兄的來的，我在想這個會不會因為我的流動相里面的有機相含量太低，水分含量太高，結(jié)果把柱子里面的填料給沖出來了��？ C18的柱子流動相里面的水的含量最低能是多少��？ 我這個反應(yīng)體系確實是圖一中峰1、2是酶反應(yīng)底物，1+2---->峰3，但是反應(yīng)10分鐘后，我用沸水煮了10分鐘，使酶失活終止反應(yīng)了，所以按道理，這個反應(yīng)不能繼續(xù)進(jìn)行了。 關(guān)于圖2，為什么加DMSO,是因為我要加入酶抑制劑，看抑制劑的抑制效果，而那些小分子抑制劑都是溶解在DMSO里面的，加入DMSO或者抑制劑后，這個大峰就出現(xiàn)了。 這個問題我一直不知道是為什么，因為我換柱子后，這個大峰就消失了，我只能認(rèn)為是柱子的原因，因為我用的是伊力特C18的柱子，這個柱子的流動相里面有機相含量最好是不能少于10%的，而我的流動相里面的有機相幾乎為0，因為加入有機相后幾個峰會連在一起而分不開，所以只能減少有機相的含量，現(xiàn)在用的是安捷倫TC-C18(2)的柱子，流動相里面加入了5%的甲醇，雖然能做出來，但是重復(fù)性不是很好，我這個星期實驗了再和大家交流下啊。 |
9樓2011-05-27 17:38:22
破土草兒
木蟲 (正式寫手)
- PhEPI: 9
- 應(yīng)助: 11 (小學(xué)生)
- 貴賓: 0.08
- 金幣: 2018.7
- 散金: 138
- 紅花: 10
- 帖子: 499
- 在線: 324.7小時
- 蟲號: 1248703
- 注冊: 2011-03-29
- 性別: GG
- 專業(yè): 中藥藥代動力學(xué)
10樓2011-05-27 18:53:37
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 yzhlasiI 的主題更新
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 278求調(diào)劑 +9 | 煙火先于春 2026-03-17 | 9/450 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 266求調(diào)劑 +3 | 哇呼哼呼哼 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 332求調(diào)劑 +3 | 鳳凰院丁真 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 346求調(diào)劑[0856] +4 | WayneLim327 2026-03-16 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)求調(diào)劑 +4 | 臨澤境llllll 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿 西北大學(xué) ，070300化學(xué)學(xué)碩，總分287，雙非一本，求調(diào)劑。 +3 | 晨昏線與星海 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料專碩英一數(shù)二306 +7 | z1z2z3879 2026-03-18 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +7 | 司空. 2026-03-18 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +7 | ^O^乜 2026-03-19 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿西南交通 專碩 材料355 本科雙非 求調(diào)劑 +5 | 西南交通專材355 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考博] 招收博士1-2人 +3 | QGZDSYS 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 081700化工學(xué)碩調(diào)劑 +3 | 【1】 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工調(diào)劑 324分 +10 | llllkkkhh 2026-03-18 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 材料考研調(diào)劑 +3 | xwt。 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0854可跨調(diào)劑，一作一項核心論文五項專利，省、國級證書40+數(shù)一英一287 +8 | 小李0854 2026-03-16 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 收復(fù)試調(diào)劑生 +4 | 雨后秋荷 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿南京大學(xué)，080500材料科學(xué)與工程，調(diào)劑 +4 | Jy? 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +5 | 素年祭語 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 318求調(diào)劑 +3 | Yanyali 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 中科院材料273求調(diào)劑 +4 | yzydy 2026-03-15 | 4/200 |
|