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biofeixue木蟲 (著名寫手)
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[求助]
沒有polyA怎么逆轉(zhuǎn)錄？
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我最近查了一些基因，想看看他們受環(huán)境的影響是表達(dá)多了還是少了？ 結(jié)果發(fā)現(xiàn)這些基因的3端都沒有polyA尾巴，為什么？另外如果沒有polyA尾巴，我怎么逆轉(zhuǎn)錄？ |
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yujiaping1
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4樓2011-05-27 13:58:39
yabxxh
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
biofeixue(金幣+5): 2011-05-27 09:30:18
西瓜(金幣+5, EPI+1): 一般試劑盒都配有隨機(jī)引物（一般是random 6 mers）和Oligo dT，樓主用隨機(jī)引物做反轉(zhuǎn)錄就可以了。也可以自己設(shè)計基因特異的引物來反轉(zhuǎn)錄，跟PCR引物差不多。推薦前者。 2011-05-27 12:56:37
biofeixue(金幣+5): 2011-05-27 09:30:18
西瓜(金幣+5, EPI+1): 一般試劑盒都配有隨機(jī)引物（一般是random 6 mers）和Oligo dT，樓主用隨機(jī)引物做反轉(zhuǎn)錄就可以了。也可以自己設(shè)計基因特異的引物來反轉(zhuǎn)錄，跟PCR引物差不多。推薦前者。 2011-05-27 12:56:37
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...，基因的話，按照其結(jié)構(gòu)應(yīng)該是有polyA的，可能你找的是編碼區(qū)吧。 沒有polya的話你可以用隨機(jī)引物，或者你自己的特定引物來反轉(zhuǎn)錄啊 好運 |
2樓2011-05-27 09:29:18
yujiaping1
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3樓2011-05-27 12:30:56
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5樓2011-05-27 13:59:29
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