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lizhijiang木蟲 (著名寫手)
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[求助]
求教MCA-peptides 降解位點的測定！
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各位老師，前輩和蟲友，大家好： 小蟲利用某種蛋白酶降解幾種MCA-peptides，想測定這種酶降解肽的肽鍵位點及能力。十種肽為： Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-MCA Boc-Phe-Ser-Arg-MCA Z-Ala-Ala-Asn-MCA Suc-Ile-Ile-Trp-MCA Boc-Val-Pro-Arg-MCA Suc-Ala-Pro-Ala-MCA ac-Asp-Glu-Val-Asp-MCA Suc-Ala-Ala-Pro-Phe-MCA Suc-Ala-Glu-MCA Val-Lys-Met-MCA. 根據(jù)資料顯示（參照外文，不知道翻譯和理解有沒有錯誤�。梢詫⑦@些底物與酶進行反應，TCA終止反應后，將反應體系用HPLC進行分別測定各反應體系與空白中某種肽的含量，可知這種酶是否能夠降解多肽。然后，裂解位點用氨基酸測序儀來完成。懇請好友指點： 1、用HPLC評價這種蛋白酶是否能夠降解，此種方法可行？是不是每個多肽都得測定標準曲線，然后還得已知裂解下來的某種氨基酸或小肽的圖譜，才能夠知道是否裂解和裂解了多少？ 2、如果1方法理解無誤，這種酶能夠水解多肽，那么，如何用氨基酸測序儀測定裂解為點？不太懂這方面知識，懇請?zhí)峁┵Y料和指導。同時，懇請方案方面的意見和建議。 金幣不多，屈膝請教！知識以授，奈何金幣？ [ Last edited by lizhijiang on 2011-5-29 at 09:24 ] |
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