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lizhijiang木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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[求助]
求教MCA-peptides 降解位點(diǎn)的測(cè)定！
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各位老師，前輩和蟲(chóng)友，大家好： 小蟲(chóng)利用某種蛋白酶降解幾種MCA-peptides，想測(cè)定這種酶降解肽的肽鍵位點(diǎn)及能力。十種肽為： Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-MCA Boc-Phe-Ser-Arg-MCA Z-Ala-Ala-Asn-MCA Suc-Ile-Ile-Trp-MCA Boc-Val-Pro-Arg-MCA Suc-Ala-Pro-Ala-MCA ac-Asp-Glu-Val-Asp-MCA Suc-Ala-Ala-Pro-Phe-MCA Suc-Ala-Glu-MCA Val-Lys-Met-MCA. 根據(jù)資料顯示（參照外文，不知道翻譯和理解有沒(méi)有錯(cuò)誤�。�，可以將這些底物與酶進(jìn)行反應(yīng)，TCA終止反應(yīng)后，將反應(yīng)體系用HPLC進(jìn)行分別測(cè)定各反應(yīng)體系與空白中某種肽的含量，可知這種酶是否能夠降解多肽。然后，裂解位點(diǎn)用氨基酸測(cè)序儀來(lái)完成。懇請(qǐng)好友指點(diǎn)： 1、用HPLC評(píng)價(jià)這種蛋白酶是否能夠降解，此種方法可行？是不是每個(gè)多肽都得測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后還得已知裂解下來(lái)的某種氨基酸或小肽的圖譜，才能夠知道是否裂解和裂解了多少？ 2、如果1方法理解無(wú)誤，這種酶能夠水解多肽，那么，如何用氨基酸測(cè)序儀測(cè)定裂解為點(diǎn)？不太懂這方面知識(shí)，懇請(qǐng)?zhí)峁┵Y料和指導(dǎo)。同時(shí)，懇請(qǐng)方案方面的意見(jiàn)和建議。 金幣不多，屈膝請(qǐng)教！知識(shí)以授，奈何金幣？ [ Last edited by lizhijiang on 2011-5-29 at 09:24 ] |
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2樓2011-05-29 09:24:58
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求指點(diǎn) 3樓2011-05-29 10:42:57
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5樓2011-05-30 07:55:44
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