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swqowen金蟲 (職業(yè)作家)
勛章歸天
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[求助]
淀粉酶的吸光度
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按照國標法做測試淀粉酶的活性,可是每次到最后的反應(yīng)液加入稀釋成的碘液和鹽酸失活時里立馬顏色變成黑紫色,吸光度根本沒發(fā)測試!開始以為是酶的濃度太高(稀釋100倍(后來稀釋10000倍還是那樣,誰做過這方面的,請教一下,是不是淀粉過期了(可溶性淀粉都是先配先做的)還是其他什么問題? |
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我提一些問題給你思考一下,你有興趣可以做一下問題里面的相關(guān)實驗。 一、 淀粉酶在70度下反應(yīng)是不是會失活?我有的淀粉酶最適作用溫度是35度的,70度一放就失活。你試過你的淀粉酶在70度的半衰期了沒? 二、 pH6.0的緩沖液才5毫升,總體積是26毫升,你測定過加進去之后pH值還是不是6.0沒有? 三、 酶活力的定義是國際單位還是別人自己瞎搞的單位?單位不同,酶活力數(shù)值有可能相差一千倍。 四、1毫升反應(yīng)液與0.5毫升0.1M的鹽酸混合之后pH值為多少?你的淀粉酶會不會失活? 五、碘液濃度多少?濃度大,就能超過Yoo法的測定范圍,Yoo法只能測到0.7。 |

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