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swqowen金蟲 (職業(yè)作家)
勛章歸天
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[求助]
淀粉酶的吸光度
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按照國(guó)標(biāo)法做測(cè)試淀粉酶的活性，可是每次到最后的反應(yīng)液加入稀釋成的碘液和鹽酸失活時(shí)里立馬顏色變成黑紫色，吸光度根本沒(méi)發(fā)測(cè)試！開(kāi)始以為是酶的濃度太高（稀釋100倍（后來(lái)稀釋10000倍還是那樣，誰(shuí)做過(guò)這方面的，請(qǐng)教一下，是不是淀粉過(guò)期了（可溶性淀粉都是先配先做的）還是其他什么問(wèn)題？ |
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swqowen
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空白試驗(yàn)方法：準(zhǔn)確吸取20ml 2%可溶性淀粉溶液，置人50ml比色管中．加5ml pH6．0緩沖溶液，搖勻．于7OC水浴預(yù)熱5min，準(zhǔn)確加入lml稀釋酶液(酶活力為每毫升60-100單位為宜)，立即計(jì)時(shí)，搖勻，于70C水浴準(zhǔn)確保溫酶解反應(yīng)5min，立即取出1ml反應(yīng)液，置^含有0，5ml 0．1mol／L鹽酸溶液中終止酶解反應(yīng)，加入5ml稀碘液，搖勻以稀碘液為空白，lcm比色皿，660nm波長(zhǎng)下測(cè)吸光度【A)，查酶濃度(c)與吸光度(A)對(duì)照表，求得酶濃度，再乘以稀釋倍數(shù)即為被測(cè)酶樣活力。測(cè)試四次取平均值.這是設(shè)計(jì)的空白試驗(yàn)方案，但每次顏色都顯示黑色。 |
9樓2011-05-30 18:13:08
jianghongyu
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2樓2011-05-30 15:34:15
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3樓2011-05-30 15:39:30
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4樓2011-05-30 16:10:34
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