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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 微生物 » 實驗/技術 » [求助]cDNA的純化方式
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30937747木蟲 (小有名氣)
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[求助]
[求助]cDNA的純化方式
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| 請問cDNA有哪些純化方式?除了試劑盒以外的.謝謝 |
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4樓2011-06-09 10:26:24
【答案】應助回帖
★ ★ ★
rainwander(金幣+3): 鼓勵交流 2011-06-05 23:07:42
rainwander(EPI+1): 2011-06-05 23:07:54
30937747(金幣+3): 我現(xiàn)在就是無法確定cDNA是單鏈，是否也能用無水乙醇和異丙醇沉淀。請問你能確定這樣做可行嗎？ 2011-06-07 07:21:40
rainwander(金幣+3): 鼓勵交流 2011-06-05 23:07:42
rainwander(EPI+1): 2011-06-05 23:07:54
30937747(金幣+3): 我現(xiàn)在就是無法確定cDNA是單鏈，是否也能用無水乙醇和異丙醇沉淀。請問你能確定這樣做可行嗎？ 2011-06-07 07:21:40
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不知樓主的cDNA是否是蛋白或鹽過多，一般這種情況下，除了使用市面上銷售的純化試劑盒外，最常用的方法就是一些經(jīng)典的方法： 如，如果是混有蛋白，一般是用苯酚氯仿抽提后，在用純的無水乙醇沉淀，最后用75%的乙醇清洗2次，用TE液或去離子水溶解后保存?zhèn)溆谩?br /> 若果是含鹽多的話，就可以省去苯酚抽提那一步，直接先用在用純的無水乙醇沉淀，最后用75%的乙醇清洗2次，用TE液或去離子水溶解后保存?zhèn)溆谩?br /> 主要在離心沉淀后，用水溶解時，不能只關心管底的那一小部分，還要記住在離心管的管壁上會粘很多樣品，否則，你會損失很大cDNA. Bless you！ |
2樓2011-06-05 22:22:47
3樓2011-06-07 21:23:07
5樓2011-06-09 10:27:29
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