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過分低調(diào)木蟲 (正式寫手)
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一般篩菌的步驟 已有16人參與
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這學(xué)期做菌種篩選有2個(gè)多月了,從一無(wú)所知到現(xiàn)在基本有些眉目。我把我做的一些工作曬出來(lái)。希望大家指正,同時(shí)也方便一些和我一樣的新手少走彎路。 第一:找文章。我篩的是纖維素分解菌。開始隨便找了幾篇中文綜述,看了一下人家的方法和培養(yǎng)基。就開始自己搗鼓了。菌是長(zhǎng)了,可不知道長(zhǎng)的是些什么。接下來(lái)做什么都不知道。建議找一些重點(diǎn)大學(xué)的碩士畢業(yè)論文,參照一下他們的東西,自己在理清一下思路。 第二:實(shí)驗(yàn)用品,器材的準(zhǔn)備。一定要提前準(zhǔn)備好。最好是列個(gè)清單。我當(dāng)時(shí)做了準(zhǔn)備去看顯微鏡,結(jié)果染色劑什么都沒買,還有就是培養(yǎng)中需要的一些藥品都沒訂。 第三:一定要當(dāng)回事去做,就是實(shí)驗(yàn)一定要嚴(yán)謹(jǐn)。要不怕苦。篩菌是個(gè)很累的活,挑菌落可能一次就上百個(gè)平板的。我因?yàn)榕吕郏兔看沃蛔隽?0個(gè)左右,結(jié)果每次都分不開,純菌株是那么的難分到。 第四:先篩到你需要的菌,之后你就可以做pH,溫度,營(yíng)養(yǎng)元素的優(yōu)化工作了,最后可以拿去誘變而提高酶活了。 以上是我的一點(diǎn)粗微的心得。 我篩纖維素分解菌,參考的是一篇蘭州大學(xué)的碩士論文。 1,配置一個(gè)CMC-Na培養(yǎng)基。pH大概5.3左右,沒調(diào)的。把樣品稀釋后涂布到平板上,30度培養(yǎng)4到5天,觀察其生長(zhǎng)?吹接袉尉湮揖蛣澗分離。 2,剛果紅染色。文獻(xiàn)上說的染色時(shí)間都不一樣。我是2個(gè)小時(shí)。反正效果不錯(cuò)。確實(shí)可以看到水解圈的。 3,挑選液體發(fā)酵培養(yǎng)。測(cè)CMC酶活。具體就這些。其他的鏡檢我都沒做。接著要做了。對(duì)了,現(xiàn)在這個(gè)天培養(yǎng)基長(zhǎng)蛆,不知道是什么原因了。 后面的工作希望那位大神幫忙指點(diǎn)下 讓我有一個(gè)更清晰的思路。謝謝! |

銅蟲 (初入文壇)

專家顧問 (知名作家)
生物大分子降解酶
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木蟲 (正式寫手)

銅蟲 (初入文壇)

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