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小木蟲論壇-學術科研互動平臺 » 生物醫(yī)藥區(qū) » 微生物 » 實驗/技術 » 一般篩菌的步驟
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過分低調木蟲 (正式寫手)
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一般篩菌的步驟 已有16人參與
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這學期做菌種篩選有2個多月了，從一無所知到現在基本有些眉目。我把我做的一些工作曬出來。希望大家指正，同時也方便一些和我一樣的新手少走彎路。 第一：找文章。我篩的是纖維素分解菌。開始隨便找了幾篇中文綜述，看了一下人家的方法和培養(yǎng)基。就開始自己搗鼓了。菌是長了，可不知道長的是些什么。接下來做什么都不知道。建議找一些重點大學的碩士畢業(yè)論文，參照一下他們的東西，自己在理清一下思路。 第二：實驗用品，器材的準備。一定要提前準備好。最好是列個清單。我當時做了準備去看顯微鏡，結果染色劑什么都沒買，還有就是培養(yǎng)中需要的一些藥品都沒訂。 第三：一定要當回事去做，就是實驗一定要嚴謹。要不怕苦。篩菌是個很累的活，挑菌落可能一次就上百個平板的。我因為怕累，就每次只做了20個左右，結果每次都分不開，純菌株是那么的難分到。 第四：先篩到你需要的菌，之后你就可以做pH，溫度，營養(yǎng)元素的優(yōu)化工作了，最后可以拿去誘變而提高酶活了。 以上是我的一點粗微的心得。 我篩纖維素分解菌，參考的是一篇蘭州大學的碩士論文。 1，配置一個CMC-Na培養(yǎng)基。pH大概5.3左右，沒調的。把樣品稀釋后涂布到平板上，30度培養(yǎng)4到5天，觀察其生長。看到有單菌落我就劃線分離。 2，剛果紅染色。文獻上說的染色時間都不一樣。我是2個小時。反正效果不錯。確實可以看到水解圈的。 3，挑選液體發(fā)酵培養(yǎng)。測CMC酶活。具體就這些。其他的鏡檢我都沒做。接著要做了。對了，現在這個天培養(yǎng)基長蛆，不知道是什么原因了。 后面的工作希望那位大神幫忙指點下 讓我有一個更清晰的思路。謝謝！ |
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