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過(guò)分低調(diào)木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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一般篩菌的步驟 已有16人參與
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這學(xué)期做菌種篩選有2個(gè)多月了，從一無(wú)所知到現(xiàn)在基本有些眉目。我把我做的一些工作曬出來(lái)。希望大家指正，同時(shí)也方便一些和我一樣的新手少走彎路。 第一：找文章。我篩的是纖維素分解菌。開(kāi)始隨便找了幾篇中文綜述，看了一下人家的方法和培養(yǎng)基。就開(kāi)始自己搗鼓了。菌是長(zhǎng)了，可不知道長(zhǎng)的是些什么。接下來(lái)做什么都不知道。建議找一些重點(diǎn)大學(xué)的碩士畢業(yè)論文，參照一下他們的東西，自己在理清一下思路。 第二：實(shí)驗(yàn)用品，器材的準(zhǔn)備。一定要提前準(zhǔn)備好。最好是列個(gè)清單。我當(dāng)時(shí)做了準(zhǔn)備去看顯微鏡，結(jié)果染色劑什么都沒(méi)買(mǎi)，還有就是培養(yǎng)中需要的一些藥品都沒(méi)訂。 第三：一定要當(dāng)回事去做，就是實(shí)驗(yàn)一定要嚴(yán)謹(jǐn)。要不怕苦。篩菌是個(gè)很累的活，挑菌落可能一次就上百個(gè)平板的。我因?yàn)榕吕�，就每次只做�?0個(gè)左右，結(jié)果每次都分不開(kāi)，純菌株是那么的難分到。 第四：先篩到你需要的菌，之后你就可以做pH，溫度，營(yíng)養(yǎng)元素的優(yōu)化工作了，最后可以拿去誘變而提高酶活了。 以上是我的一點(diǎn)粗微的心得。 我篩纖維素分解菌，參考的是一篇蘭州大學(xué)的碩士論文。 1，配置一個(gè)CMC-Na培養(yǎng)基。pH大概5.3左右，沒(méi)調(diào)的。把樣品稀釋后涂布到平板上，30度培養(yǎng)4到5天，觀察其生長(zhǎng)。看到有單菌落我就劃線(xiàn)分離。 2，剛果紅染色。文獻(xiàn)上說(shuō)的染色時(shí)間都不一樣。我是2個(gè)小時(shí)。反正效果不錯(cuò)。確實(shí)可以看到水解圈的。 3，挑選液體發(fā)酵培養(yǎng)。測(cè)CMC酶活。具體就這些。其他的鏡檢我都沒(méi)做。接著要做了。對(duì)了，現(xiàn)在這個(gè)天培養(yǎng)基長(zhǎng)蛆，不知道是什么原因了。 后面的工作希望那位大神幫忙指點(diǎn)下 讓我有一個(gè)更清晰的思路。謝謝！ |
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4樓2011-06-09 16:20:01
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