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炒飯大王銅蟲(chóng) (小有名氣)
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親和層析blue sepharose 6 Fast Flow 純化羰基還原酶的問(wèn)題
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以20mM 6.5 磷酸鹽緩沖液平衡, 樣品上樣后,平衡液淋洗, 以5mM NAD+(溶于20mM 6.5 磷酸鹽緩沖液)洗脫,出現(xiàn)一個(gè)很巨大的峰,但是其中沒(méi)有酶活,也就是沒(méi)有結(jié)合目的蛋白,而上樣淋洗液里有酶活。 現(xiàn)在的問(wèn)題是為什么會(huì)不結(jié)合,目的蛋白是與輔酶一結(jié)合的,檢測(cè)酶活也是利用輔酶一的減少來(lái)進(jìn)行的。 是pH的問(wèn)題?pH對(duì)親和的影響大么, 是上樣量的問(wèn)題? 大家看呢 |
銅蟲(chóng) (小有名氣)
木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

銅蟲(chóng) (小有名氣)
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