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小新3858木蟲 (正式寫手)
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[求助]
為什么考馬斯亮藍(lán)染色能看到我要的條帶，weston卻看不到呢？
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| RT，我每次做電泳都是做兩塊，一塊考馬斯亮藍(lán)染色，一塊做weston，每次都是考染有條帶，weston卻看不到，，我做weston做的不多，大俠們幫忙分析一下原因 |
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zsy1106
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）做不出來就有很多可能了：
4樓2011-06-22 10:16:29
睡著數(shù)綿羊
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2樓2011-06-22 09:25:15
小新3858
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3樓2011-06-22 10:02:43
didillytao
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【答案】應(yīng)助回帖
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lstt09nk(金幣+2): 鼓勵(lì)交流 2011-06-22 17:23:37
lstt09nk(金幣+2): 鼓勵(lì)交流 2011-06-22 17:23:37
| 如果你能確定染出來的條帶是你要的話,那么應(yīng)該是western的轉(zhuǎn)膜,一抗,二抗,ecl中某個(gè)出了問題.不知道你們是不是濕轉(zhuǎn),膜在半干的狀態(tài)下也能看到蛋白條帶,你可以看一看確定有沒有蛋白轉(zhuǎn)到膜上,還有就是一抗和二抗的驗(yàn)證,二抗直接滴在膜上加ECL顯色就可以驗(yàn)證好不好用,效價(jià)怎么樣,而一抗的話以前用過嗎?顯色是沒問題的嗎?有沒有過期之類的,而且ECL底物發(fā)光時(shí)間是有時(shí)限的,有些比較靈敏的ECL發(fā)光時(shí)間很短,如果動作慢可能熒光就會猝滅了,我覺得原因很多,樓主看一看哪項(xiàng)更有可能,希望能幫到你~~ |
5樓2011-06-22 10:16:36
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