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piaoyuaaa金蟲 (小有名氣)
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[求助]
PCR-DGGE的問題
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| DGGE電泳后把每條帶割下來,用30微升無菌水放4度冰箱過夜,隨后吸取10微升為模板進(jìn)行巢式PCR,擴(kuò)出亮帶,然后把每條帶再跑二次DGGE,竟然每個(gè)樣品(每個(gè)條帶的PCR產(chǎn)物)跑出來的條帶一致,并且條帶很多,怎么回事呢?理論上講不是再把每條帶跑的話應(yīng)該是一條帶的,但實(shí)際上條帶也太多了,郁悶的是每個(gè)樣品跑出來的帶是一樣的。聽同學(xué)說有跑一次DGGE回收膠測(cè)序的,我這種情況,想把第一次回收的每條帶用不帶GC夾的引物P一下測(cè)序,不知道可以不可以,做這一方面的蟲友幫幫忙,謝謝! |
金蟲 (正式寫手)
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