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tmhua鐵蟲 (小有名氣)
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[求助]
無孢子真菌的保存方法
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本人最近分離到一些無孢子真菌,需要保存。但不知道哪種保存方法較為合適。以前用甘油保存,結(jié)果半年后發(fā)現(xiàn)有些轉(zhuǎn)出來活化不出來了。 求有做這方面的大蝦能幫幫我。 |
木蟲 (著名寫手)
木蟲 (著名寫手)
專家顧問 (知名作家)
生物大分子降解酶
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專家經(jīng)驗(yàn): +248 |
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假如將真菌在斜面培養(yǎng)基上接種,等其生長起來之后,整枝試管放進(jìn)去-80度,那么真菌的生命活動進(jìn)入休眠,細(xì)胞內(nèi)部的水結(jié)晶形成冰晶,在再拿出來到常溫下的時(shí)候,冰晶復(fù)融,這個(gè)過程可能會對細(xì)胞器造成機(jī)械損傷,使真菌細(xì)胞生命力下降。所以在低溫保存時(shí)需要加入甘油或者其它物質(zhì)做保護(hù)劑。 這個(gè)回帖令我想起石蠟保存法,就是讓真菌生長起來之后加入液體石蠟覆蓋菌落,然后常溫或者低溫保存,我沒這樣做過,也不知道效果如何,但是這個(gè)方法在微生物實(shí)驗(yàn)技術(shù)之類的書上有相關(guān)介紹。 我現(xiàn)在用的是低溫保存,用20%甘油作為保護(hù)劑,我比樓主幸運(yùn),我的菌絲是液體發(fā)酵搖瓶里得到的,那時(shí)候還沒有孢子,而半年后用平板來活化還是長得很好。不知道是不是樓主的甘油濃度出問題,還是某些真菌真的不適合這樣保存。 照理說孢子的抗逆性比菌絲強(qiáng),如果有孢子,保存效果會好一些,我也試過有一株真菌在平板上長好之后放在4度半年之后接種不活的,當(dāng)時(shí)后悔沒有早用甘油保存。真菌在不同的培養(yǎng)基上生長狀況會不同,換培養(yǎng)基可能會產(chǎn)孢子,就我的經(jīng)驗(yàn)來說,PDA含有大量葡萄糖,很利于真菌生長,所以菌絲發(fā)達(dá)孢子稀疏,但如果換了一種培養(yǎng)基,情況可能會不同。我曾經(jīng)用幾種培養(yǎng)基來培養(yǎng)一株真菌,用來獲取大量孢子,結(jié)果PDA是效果最差的,不知道樓主有沒有試過換培養(yǎng)基。 |

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