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terry890新蟲 (小有名氣)
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[求助]
梯度過柱洗脫
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| 梯度過柱洗脫，如果梯度變化過大會有什么影響？是有氣泡嗎？ |
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【答案】應(yīng)助回帖
★
novus(金幣+1, EPI+1): 說的不錯！ 2011-07-05 20:06:46
novus(金幣+1, EPI+1): 說的不錯！ 2011-07-05 20:06:46
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換梯度時，要特意留一些上一梯度的溶劑在柱子上端。將下一個梯度的溶劑裝在分液漏斗中（漏斗上端密閉，下端打開），放在柱子上面，這樣柱子下端流出一滴，分液漏斗就會補充一滴，既可以控制柱子中溶劑的高度不變，從而使柱流速穩(wěn)定；又可以使分液漏斗中流出的每一滴溶劑都被下面的溶劑稀釋，從而完成兩個梯度間的平穩(wěn)過渡。 我認(rèn)為這樣做有三個好處： 1 省事。免得在旁邊看著小心別讓柱子流干。 2 減少產(chǎn)生氣泡的危險，特別是梯度比較大時，這招很管用。不過下個梯度要稍微多沖些時間才能平衡。有人說20％的濃度差是比較安全的。用此法，我曾經(jīng)成功地將20％的甲醇－水溶液直接換到100％的甲醇，而柱子安然無恙。 3 上個梯度溶劑被下個梯度溶劑慢慢稀釋，使梯度的變化不致過于激烈，起到緩沖作用，效果有點像線性連續(xù)梯度，豈不是很好。 |
2樓2011-07-05 17:05:33
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3樓2011-07-05 17:52:35
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牛 |
4樓2011-07-05 20:07:33
5樓2011-07-05 20:52:28
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10樓2011-07-17 12:32:36
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