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terry890新蟲 (小有名氣)
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[求助]
梯度過(guò)柱洗脫
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| 梯度過(guò)柱洗脫，如果梯度變化過(guò)大會(huì)有什么影響？是有氣泡嗎？ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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novus(金幣+1, EPI+1): 說(shuō)的不錯(cuò)！ 2011-07-05 20:06:46
novus(金幣+1, EPI+1): 說(shuō)的不錯(cuò)！ 2011-07-05 20:06:46
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換梯度時(shí)，要特意留一些上一梯度的溶劑在柱子上端。將下一個(gè)梯度的溶劑裝在分液漏斗中（漏斗上端密閉，下端打開），放在柱子上面，這樣柱子下端流出一滴，分液漏斗就會(huì)補(bǔ)充一滴，既可以控制柱子中溶劑的高度不變，從而使柱流速穩(wěn)定；又可以使分液漏斗中流出的每一滴溶劑都被下面的溶劑稀釋，從而完成兩個(gè)梯度間的平穩(wěn)過(guò)渡。 我認(rèn)為這樣做有三個(gè)好處： 1 省事。免得在旁邊看著小心別讓柱子流干。 2 減少產(chǎn)生氣泡的危險(xiǎn)，特別是梯度比較大時(shí)，這招很管用。不過(guò)下個(gè)梯度要稍微多沖些時(shí)間才能平衡。有人說(shuō)20％的濃度差是比較安全的。用此法，我曾經(jīng)成功地將20％的甲醇－水溶液直接換到100％的甲醇，而柱子安然無(wú)恙。 3 上個(gè)梯度溶劑被下個(gè)梯度溶劑慢慢稀釋，使梯度的變化不致過(guò)于激烈，起到緩沖作用，效果有點(diǎn)像線性連續(xù)梯度，豈不是很好。 |
2樓2011-07-05 17:05:33
wxs501
鐵桿木蟲 (著名寫手)
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3樓2011-07-05 17:52:35
|
牛 |
4樓2011-07-05 20:07:33
5樓2011-07-05 20:52:28
xiaoxiao270
至尊木蟲 (著名寫手)
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6樓2011-07-05 23:01:21
yishui07
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7樓2011-07-06 11:54:35
wanyiku
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
qinhy(金幣+3): 鼓勵(lì)新蟲回帖~ 2011-07-06 21:37:02
qinhy(金幣+3): 鼓勵(lì)新蟲回帖~ 2011-07-06 21:37:02
| 一個(gè)梯度用多少洗脫劑，我從未算過(guò)，一般我一直洗到?jīng)]有東西再換另一梯度，前一個(gè)洗脫劑當(dāng)流到和柱高（我的是硅膠+樣品+硅膠+棉花的高度）一致時(shí)，我直接加下一個(gè)梯度的洗脫劑，會(huì)不會(huì)有氣泡，沒(méi)考慮那么多，不過(guò)我的還好，除了開始洗脫時(shí)會(huì)有一點(diǎn)氣泡，排除完后，換洗脫劑也沒(méi)發(fā)現(xiàn)氣泡，一直都很好，我的是干法裝柱 |
8樓2011-07-06 13:29:08
9樓2011-07-07 11:06:07
woshiqq23
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10樓2011-07-17 12:32:36
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