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terry890新蟲 (小有名氣)
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[求助]
梯度過柱洗脫
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| 梯度過柱洗脫,如果梯度變化過大會(huì)有什么影響?是有氣泡嗎? |
主管區(qū)長(zhǎng) (職業(yè)作家)
制粒能手
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換梯度時(shí),要特意留一些上一梯度的溶劑在柱子上端。將下一個(gè)梯度的溶劑裝在分液漏斗中(漏斗上端密閉,下端打開),放在柱子上面,這樣柱子下端流出一滴,分液漏斗就會(huì)補(bǔ)充一滴,既可以控制柱子中溶劑的高度不變,從而使柱流速穩(wěn)定;又可以使分液漏斗中流出的每一滴溶劑都被下面的溶劑稀釋,從而完成兩個(gè)梯度間的平穩(wěn)過渡。 我認(rèn)為這樣做有三個(gè)好處: 1 省事。免得在旁邊看著小心別讓柱子流干。 2 減少產(chǎn)生氣泡的危險(xiǎn),特別是梯度比較大時(shí),這招很管用。不過下個(gè)梯度要稍微多沖些時(shí)間才能平衡。有人說20%的濃度差是比較安全的。用此法,我曾經(jīng)成功地將20%的甲醇-水溶液直接換到100%的甲醇,而柱子安然無恙。 3 上個(gè)梯度溶劑被下個(gè)梯度溶劑慢慢稀釋,使梯度的變化不致過于激烈,起到緩沖作用,效果有點(diǎn)像線性連續(xù)梯度,豈不是很好。 |

鐵桿木蟲 (著名寫手)
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牛 |
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