 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 991 | 回復(fù): 4 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
[求助]
崩潰啊�。�！關(guān)于轉(zhuǎn)化
|
||
|
使用Ferments公司的NotI,NocI內(nèi)切酶 雙酶切pET22b及目的基因（37度，3小時(shí)），T4連接酶連接過夜，化學(xué)轉(zhuǎn)化E.coli Bl21或JM109或DH5a，涂布SOB培養(yǎng)基，就出現(xiàn)以下情況： 1 ：攜帶目的基因的菌不長，而陽性對(duì)照長的很好 2：這樣做幾次后，嘗試使用JM109，結(jié)果。。。陽性對(duì)照和目的克隆都不長，抓狂ing 3：好不容易長了幾個(gè)克隆，挑取后于含Amp的LB培養(yǎng)基中，就是不長，無語問蒼天 一氣之下，改用電轉(zhuǎn)，結(jié)果 克隆確實(shí)長出來，挑取的菌落也在含Amp的LB培養(yǎng)基中生長良好，菌液PCR也能觀察到目的條帶 但是，但是�。�！送去測序，竟然又出現(xiàn)這樣的情況 1· 提不出質(zhì)粒 2 即使提出質(zhì)粒，T7啟動(dòng)子測序無信號(hào)��！ 3 剛剛好不容易有一個(gè)樣品有信號(hào)，將之通過BLastX與原來的序列 比對(duì)，竟然發(fā)現(xiàn)沒有相似性�。。。� 蒼天啊，大地�。�！ 測序都做了快2個(gè)月了，就這么簡單的轉(zhuǎn)化，做了一個(gè)學(xué)期了�。。。。。� 崩潰啊，跪求指點(diǎn)啊，哪位高人告訴我怎么回事�。� |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
309求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
一志愿南航 335分 | 0856 | GPA 4.07 | 有科研經(jīng)歷
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
求化學(xué)調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
085600，材料與化工321分求調(diào)劑
已經(jīng)有10人回復(fù)
-
0703 化學(xué) 求調(diào)劑，一志愿山東大學(xué) 342 分
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
一志愿南開大學(xué)0710生物學(xué)359求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
085600，專業(yè)課化工原理，320分求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
材料與化工272求調(diào)劑
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
290求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 求助關(guān)于轉(zhuǎn)化的問題？
已經(jīng)有22人回復(fù)
- 【求助/交流】這是什么菌啊，為什么送公司鑒定都說失敗呢，崩潰
已經(jīng)有34人回復(fù)
anlewo7777
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 12 (小學(xué)生)
- 金幣: 1786.8
- 散金: 7
- 紅花: 3
- 帖子: 341
- 在線: 108.3小時(shí)
- 蟲號(hào): 314883
- 注冊: 2007-02-25
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物
3樓2011-07-14 16:25:11
anlewo7777
木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 12 (小學(xué)生)
- 金幣: 1786.8
- 散金: 7
- 紅花: 3
- 帖子: 341
- 在線: 108.3小時(shí)
- 蟲號(hào): 314883
- 注冊: 2007-02-25
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物
2樓2011-07-14 16:19:53
cclh
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 28
- 帖子: 4
- 在線: 43分鐘
- 蟲號(hào): 6349300
- 注冊: 2017-04-19
- 專業(yè): 果樹學(xué)
4樓2017-06-11 19:04:40
wang_xiaoxu
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 180.5
- 帖子: 2
- 在線: 11.6小時(shí)
- 蟲號(hào): 6051001
- 注冊: 2017-03-19
- 性別: MM
- 專業(yè): 獸醫(yī)寄生蟲學(xué)
5樓2017-10-26 20:11:47
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿南航 335分 | 0856 | GPA 4.07 | 有科研經(jīng)歷 +8 | cccchenso 2026-03-29 | 8/400 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 求化學(xué)調(diào)劑 +5 | wulanna 2026-03-28 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +3 | dfffsar 2026-03-29 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 【求調(diào)劑】085601材料工程專碩 | 總分272 | +7 | 腳滑的守法公民 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 22408 359分調(diào)劑 +4 | Qshers 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 289求調(diào)劑 +13 | 新時(shí)代材料 2026-03-27 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 本科新能源科學(xué)與工程，一志愿華理能動(dòng)285求調(diào)劑 +7 | AZMK 2026-03-28 | 11/550 |
|
|
|
[考研] 343求調(diào)劑 +5 | 愛羈絆 2026-03-28 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 調(diào)劑 +3 | 好好讀書。 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 292求調(diào)劑 +14 | 鵝鵝鵝額額額額?/a> 2026-03-25 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +4 | 丟掉懶惰 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +10 | jjjjjjjjjjl 2026-03-27 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +4 | AZMK 2026-03-27 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 333求調(diào)劑 +3 | question挽風(fēng) 2026-03-23 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +9 | 小蠟新筆 2026-03-26 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +4 | lim0922 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑323材料與化工 +7 | 1124361 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研]
 085602化學(xué)工程求調(diào)劑。
+4
|
平樂樂樂 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | 李李不服輸 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 328求調(diào)劑 +4 | LHHL66 2026-03-23 | 4/200 |
|