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william9798銅蟲 (小有名氣)
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[求助]
質(zhì)粒上的基因敲除與染色體上的基因敲除有什么區(qū)別嗎？
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| 我需要敲除的基因在一個(gè)菌的質(zhì)粒上，采用同源重組的方法，插入一個(gè)抗性基因使其失活。我不知道操作方法與染色體上的基因敲除方法是不是一樣的？有什么區(qū)別嗎？能提供相關(guān)文獻(xiàn)最好，謝謝 |
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yguang
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【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
西瓜(金幣+2): good 2011-08-13 15:47:46
william9798(金幣+10): 2011-08-21 03:55:08
西瓜(金幣+2): good 2011-08-13 15:47:46
william9798(金幣+10): 2011-08-21 03:55:08
| 本質(zhì)上沒(méi)區(qū)別，質(zhì)粒上應(yīng)該選擇更多一些，比如要敲除的基因內(nèi)部如果有相同酶切位點(diǎn)的，直接用這個(gè)酶切后連接即得到此基因部分缺失的突變，在質(zhì)粒上也很方便做點(diǎn)突變，好多試劑盒都可以做好幾個(gè)點(diǎn)的突變！ |
william97982樓2011-08-13 00:33:30
william9798
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3樓2011-08-13 00:41:59
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引用回帖: 1598975樓: Originally posted by lwq652 at 2012-04-05 11:56:40: 其實(shí)體內(nèi)質(zhì)粒重組有點(diǎn)難度的，因?yàn)樯婕百|(zhì)粒的拷貝數(shù)，如果是單拷貝的，那么跟基因組差不多，但是如果是多拷貝的，那么只要有一個(gè)重組了就顯示抗性了 這個(gè)不是問(wèn)題 為什么說(shuō)不是問(wèn)題，1598975說(shuō)的問(wèn)題確實(shí)存在，若要敲除質(zhì)粒中的上的一個(gè)基因，若質(zhì)粒是多拷貝，部分質(zhì)粒上基因能被敲除，部分仍含有此段基因的質(zhì)粒仍能存在，敲除工作不能成功，， |
7樓2012-06-26 14:53:35
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9樓2014-03-24 21:08:05
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