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babysandra木蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
請(qǐng)教一個(gè)關(guān)于GFP作為報(bào)告基因的問(wèn)題
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| 本人不是學(xué)分子的,不太懂分子。聽(tīng)到有的實(shí)驗(yàn)室這么做過(guò),但是不知道為什么,怎么弄的,形容出來(lái)大家?guī)兔忉屢幌隆?br /> 他們做的是A基因。將A基因和GFP一起轉(zhuǎn)入細(xì)胞,空白是只轉(zhuǎn)入GFP的細(xì)胞。我知道是用病毒和shRNA轉(zhuǎn)的。然后在熒光顯微鏡下觀察時(shí),有A基因表達(dá)的細(xì)胞,和只有GFP表達(dá)的細(xì)胞相比,GFP會(huì)相應(yīng)降低表達(dá)。這樣在觀察時(shí),只要有A基因,GFP表達(dá)就降低,這是怎么做到的呢。A基因和GFP怎么樣建立起了這種聯(lián)系。 |
木蟲(chóng) (小有名氣)
新蟲(chóng) (小有名氣)
金蟲(chóng) (小有名氣)
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樓主說(shuō)的是不是這個(gè)意思: 1、含有GFP報(bào)告基因的質(zhì)粒上有實(shí)驗(yàn)者的目標(biāo)基因。 2、利用病毒介導(dǎo)法轉(zhuǎn)染到細(xì)胞,而A基因含有針對(duì)目標(biāo)基因的shRNA。 3、這樣同時(shí)轉(zhuǎn)染A基因和GFP的質(zhì)粒,在細(xì)胞內(nèi)A基因要干擾GFP質(zhì)粒的表達(dá)。自然GFP表達(dá)量下降。這是就證明了,在GFP質(zhì)粒上的目標(biāo)基因表達(dá)量下降。 |
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