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Ag6501金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[交流]
蛋白酶基因表達(dá),用的Bacillus subtilis系統(tǒng),但總是表達(dá)不出,求高人指點(diǎn)…… 已有11人參與
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最近在用Mo Bi Tec的WB800N菌株和pHT43載體這個(gè)系統(tǒng)做蛋白酶基因的表達(dá),基因序列全部正確,方法是:1、將轉(zhuǎn)化過(guò)的菌株過(guò)夜培養(yǎng),37度,220rpm;2、取菌液100微升轉(zhuǎn)接入新培養(yǎng)基,37度,220rpm,培養(yǎng)至OD600為0.7-0.8之間,加入IPTG使終濃度為1mM;3、繼續(xù)培養(yǎng),并讓轉(zhuǎn)速降一些,37度,3h;4、檢測(cè)蛋白酶的表達(dá)。 但始終沒(méi)有檢測(cè)到蛋白產(chǎn)物,求各位高人指點(diǎn),究竟是哪里出了問(wèn)題,謝謝! 真愁,哎~~~~ |

銀蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

銀蟲(chóng) (小有名氣)
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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新蟲(chóng) (初入文壇)
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