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Ag6501金蟲 (正式寫手)
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[交流]
蛋白酶基因表達(dá)，用的Bacillus subtilis系統(tǒng)，但總是表達(dá)不出，求高人指點…… 已有11人參與
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最近在用Mo Bi Tec的WB800N菌株和pHT43載體這個系統(tǒng)做蛋白酶基因的表達(dá)，基因序列全部正確，方法是：1、將轉(zhuǎn)化過的菌株過夜培養(yǎng)，37度，220rpm；2、取菌液100微升轉(zhuǎn)接入新培養(yǎng)基，37度，220rpm，培養(yǎng)至OD600為0.7-0.8之間，加入IPTG使終濃度為1mM；3、繼續(xù)培養(yǎng)，并讓轉(zhuǎn)速降一些，37度，3h；4、檢測蛋白酶的表達(dá)。 但始終沒有檢測到蛋白產(chǎn)物，求各位高人指點，究竟是哪里出了問題，謝謝！ 真愁，哎~~~~ |
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Ag6501
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9樓2011-11-12 18:24:42
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4樓2011-11-08 10:25:45
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