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hc1027木蟲 (正式寫手)
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[求助]
酶基因表達(dá)量高,酶活性就一定高嗎?(請大家?guī)蛶兔,謝謝)
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1、請問大家,用qPCR研究酶基因在不同階段的表達(dá)情況,結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同階段酶活性的大小與酶基因的表達(dá)量不一致,這是什么原因呢? 2、酶基因表達(dá)量高,酶活性就一定高嗎?這兩者有相關(guān)性嗎?之間有什么影響因素呢? 3、請問大家用qPCR研究酶基因在不同階段的表達(dá)情況,那能得到什么稍微宏觀點(diǎn)的結(jié)論呢?(如果知道某基因的表達(dá)增加了,某基因的表達(dá)減少了) 謝謝大家 |
【分子生物】EPI帖 | 經(jīng)驗(yàn) | 基因表達(dá)量、酶活 | 散點(diǎn)知識(shí)元 |
木蟲 (正式寫手)
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這個(gè)其實(shí)很難說,基因表達(dá)量高只能說明合成的多肽鏈數(shù)量比較多,但是從多肽鏈到具有活性的酶還需要很復(fù)雜的修飾折疊等等~~ 比方說你表達(dá)是糖蛋白,就存在糖基化的問題,糖基化不足或者過糖基化都會(huì)對酶活力有影響,多肽鏈合成很多但是糖基化不足當(dāng)然酶活力不會(huì)隨基因表達(dá)量成正比~~ 再比如說大腸桿菌有包涵體的問題,包涵體形式的蛋白是沒有生物活性的~~~~ 我覺得有可能是你的表達(dá)系統(tǒng)的原因,因?yàn)槎嚯逆湹男揎椪郫B主要是你的表達(dá)系統(tǒng)的作用而不是基因編碼的作用~~ |
木蟲 (著名寫手)
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發(fā)表個(gè)人觀點(diǎn): 一、基因表達(dá)量和酶活性是兩個(gè)獨(dú)立的概念,所以要分清楚,不要認(rèn)為表達(dá)量高酶活性就高,表達(dá)量低酶活性就低 二、研究基因表達(dá)量和酶活性之間的關(guān)系,要以你所研究內(nèi)容事實(shí)為分析對象,要把兩者分開來研究,首先研究基因的表達(dá)情況,是高還是低,如果是定量的話,要用數(shù)據(jù)描述一下這個(gè)基因在條件變化時(shí)是怎樣變化的,其次是在了解這個(gè)基因產(chǎn)物即蛋白的功能基礎(chǔ)上要做蛋白功能的變化研究,然后把這2者聯(lián)系起來加以分析,是正相關(guān)還是負(fù)相關(guān)或是其他情況就有待于你自己的分析了,最后在實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上得出你的實(shí)驗(yàn)結(jié)論,當(dāng)然還可以通過其他方法對你的實(shí)驗(yàn)結(jié)論加以進(jìn)一步的驗(yàn)證是最好的。不管怎么樣,分析和討論是少不了的也是必要的,關(guān)鍵的就是你自己要認(rèn)真的去做就會(huì)有收獲~ ![]() 亂侃,別介意啊~祝實(shí)驗(yàn)順利噢~ |
木蟲 (正式寫手)
木蟲 (職業(yè)作家)
木蟲 (正式寫手)
木蟲 (正式寫手)
銀蟲 (正式寫手)
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恩 沒做過這個(gè) 但是說點(diǎn)自己的看法 這個(gè)酶的表達(dá)量高 說明對這個(gè)酶的需求量多 但不代表這個(gè)酶的活性就是高的 酶活的定義是在特定條件下,1分鐘內(nèi)轉(zhuǎn)化1微摩爾底物,或者底物中1微摩爾有關(guān)基團(tuán)所需的酶量。 說的簡單點(diǎn) 同樣底物需要表達(dá)量很高的酶才能作用完畢,是不是說明這個(gè)酶的活力是低的呢 |
木蟲 (正式寫手)
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