 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 1546 | 回復: 4 | ||
[求助]
相對定量測基因相對表達量，急�。。�！
|
|
老師要求本人測定水稻抗旱相關的20多個基因的相對表達量，有四個樣。太多了，而且樣品有限。我沒有測擴增效率，直接用雙△法測表達量了。內參是用的UBQ5，一個印度人寫的。現(xiàn)在遇到很多問題，用的是TAKARA的熒光定量試劑盒， 1、好幾個基因CT值都大于35，我提高了模板濃度也不行（我沒測RNA濃度，直接測cDNA濃度，然后調成與試劑盒要求的DNA的量來做）。 2、PCR反應過程都按照說明書上設置了，沒改改動，循環(huán)數(shù)40個，因為不太會改。另外用primer5算出的溫度，還是用Oligo6算出的溫度？因為試劑盒說明書上只給出了Oligo6的溫度范圍。 3、我跑普通PCR的時候有時候沒條帶，但跑熒光的時候特異性很好。那是不是沒必要跑普通PCR了呢？不過我聽其他實驗室人說，要先跑梯度PCR，找出最適退火溫度，然后再上熒光PCR。 4、有時候有非特異性擴增，提高溫度了還不行，是不是要換引物了？ 不好意思，本人新手不太懂，折騰了好幾千塊錢了，還沒出什么結果，很是焦急。求大神指導，不勝感激！��！ |
回復此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復
-
化學工程及工業(yè)化學論文潤色/翻譯怎么收費?
已經(jīng)有151人回復
-
蛋白質檢測：精準分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴謹設計，解析生命機制的重要載體
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準篩查，守護健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標南京
已經(jīng)有0人回復
» 本主題相關商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 相對定量熒光PCR結果分析中的SD如何計算？
已經(jīng)有7人回復
- 熒光定量PCR，是相對定量相關問題請教。
已經(jīng)有4人回復
- 新基因的克隆和熒光定量表達比較好發(fā)的SCI雜志
已經(jīng)有12人回復
- 請問大家分析抗性基因（或差異表達基因等相關的）的方法有哪些？比如DNA微陣列。。。
已經(jīng)有10人回復
- 關于基因表達量下調的問題
已經(jīng)有3人回復
- 酶基因的過表達怎么檢測呢
已經(jīng)有8人回復
- 相對定量PCR求助
已經(jīng)有16人回復
- 關于我的研究課題：水稻抗病基因的表達研究
已經(jīng)有4人回復
- 酶基因表達量高，酶活性就一定高嗎？（請大家?guī)蛶兔�，謝謝）
已經(jīng)有12人回復
- 相對定量PCR 基線
已經(jīng)有16人回復
- 熒光定量PCR(相對定量)的分析結果2-△△Ct怎么看呀?
已經(jīng)有31人回復
- 【求助/交流】RNA的提取問題和qRT-PCR分析基因在不同時間的定量表達
已經(jīng)有10人回復
xw19880905
新蟲 (小有名氣)
- 應助: 24 (小學生)
- 金幣: 419.1
- 帖子: 74
- 在線: 10.4小時
- 蟲號: 1530022
- 注冊: 2011-12-09
- 專業(yè): 系統(tǒng)生物學
宮保雞丁YZ2樓2012-07-19 17:18:09
3樓2012-07-19 20:50:02
xw19880905
新蟲 (小有名氣)
- 應助: 24 (小學生)
- 金幣: 419.1
- 帖子: 74
- 在線: 10.4小時
- 蟲號: 1530022
- 注冊: 2011-12-09
- 專業(yè): 系統(tǒng)生物學
4樓2012-07-20 09:48:28
5樓2012-07-20 10:09:28
相關版塊跳轉
我要訂閱樓主 宮保雞丁YZ 的主題更新
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料與化工304求B區(qū)調劑 +6 | 邱gl 2026-03-11 | 7/350 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 326求調劑 +4 | 諾貝爾化學獎覬?/a> 2026-03-15 | 7/350 |
|
|
[考研] 本人考085602 化學工程 專碩 +12 | 不知道叫什么！ 2026-03-15 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 0703化學調劑 +6 | 妮妮ninicgb 2026-03-15 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 材料工程327求調劑 +3 | xiaohe12w 2026-03-11 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 中科大材料專碩319求調劑 +3 | 孟鑫材料 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 297一志愿上交085600求調劑 +5 | 指尖八千里 2026-03-14 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 265求調劑 +4 | 威化餅07 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 308求調劑 +3 | 是Lupa啊 2026-03-10 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 26考研調劑 +3 | ying123. 2026-03-10 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 327求調劑 +4 | Ffff03 2026-03-10 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 311求調劑 +8 | zchqwer 2026-03-10 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 0805，333求調劑 +3 | 112253525 2026-03-10 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 337一志愿華南理工0805材料求調劑 +7 | mysdl 2026-03-11 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿中科院，化學方向，295求調劑 +4 | 一氧二氮 2026-03-11 | 4/200 |
|
|
|
[碩博家園] 085600 260分求調劑 +3 | 天空還下雨么 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0856化工原理 +6 | z2839474511 2026-03-10 | 6/300 |
|
|
|
[考博] 2026年博士申請 +3 | QwQwQW10 2026-03-11 | 3/150 |
|
|
|
[考博] 讀博申請 +5 | 感dd 2026-03-10 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 290求調劑 +3 | 柯淮然 2026-03-10 | 8/400 |
|