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相對定量PCR求助 已有2人參與
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本人剛接觸分子,想請教各位牛人有關實時定量熒光PCR的一些問題。我要做不同土壤位點某類微生物的相對量的多少,所以想做相對定量PCR,初步的實驗思路如下: 1提取各位點土壤中的DNA。 2實時熒光PCR。將某位點的DNA連續(xù)稀釋7個10倍梯度,設定DNA的終拷貝數(shù)分別為100-10-7n/ul,用來做相對定量的標曲 3.已知這類微生物的特征基因A,用A基因擴增引物擴增上步中不同稀釋倍數(shù)DNA中的A基因及其他位點樣品的A基因。設定閾值,通過Ct值計算出各位點中A基因模板的相對拷貝數(shù),從而得出各位點某類微生物的相對多少 不知道我的想法是不是對的?請各位指教,我會虛心接受大家的意見。另外我看好多有要管家基因,我這里需要管家基因嘛? |
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