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[求助]
相對(duì)定量PCR求助 已有2人參與
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本人剛接觸分子，想請(qǐng)教各位牛人有關(guān)實(shí)時(shí)定量熒光PCR的一些問題。我要做不同土壤位點(diǎn)某類微生物的相對(duì)量的多少，所以想做相對(duì)定量PCR，初步的實(shí)驗(yàn)思路如下： 1提取各位點(diǎn)土壤中的DNA。 2實(shí)時(shí)熒光PCR。將某位點(diǎn)的DNA連續(xù)稀釋7個(gè)10倍梯度，設(shè)定DNA的終拷貝數(shù)分別為100-10-7n/ul，用來做相對(duì)定量的標(biāo)曲 3.已知這類微生物的特征基因A,用A基因擴(kuò)增引物擴(kuò)增上步中不同稀釋倍數(shù)DNA中的A基因及其他位點(diǎn)樣品的A基因。設(shè)定閾值，通過Ct值計(jì)算出各位點(diǎn)中A基因模板的相對(duì)拷貝數(shù)，從而得出各位點(diǎn)某類微生物的相對(duì)多少 不知道我的想法是不是對(duì)的？請(qǐng)各位指教，我會(huì)虛心接受大家的意見。另外我看好多有要管家基因，我這里需要管家基因嘛？ |
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2樓2011-10-01 15:44:44
wqj1988926
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10樓2012-11-01 09:29:14
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