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hc1027木蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
酶基因表達(dá)量高，酶活性就一定高嗎？（請(qǐng)大家?guī)蛶兔�，謝謝）
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1、請(qǐng)問(wèn)大家，用qPCR研究酶基因在不同階段的表達(dá)情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)不同階段酶活性的大小與酶基因的表達(dá)量不一致，這是什么原因呢？ 2、酶基因表達(dá)量高，酶活性就一定高嗎？這兩者有相關(guān)性嗎？之間有什么影響因素呢？ 3、請(qǐng)問(wèn)大家用qPCR研究酶基因在不同階段的表達(dá)情況，那能得到什么稍微宏觀點(diǎn)的結(jié)論呢？（如果知道某基因的表達(dá)增加了，某基因的表達(dá)減少了） 謝謝大家  |
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【答案】應(yīng)助回帖
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dhd997(金幣+5): 鼓勵(lì)交流 2011-05-30 18:52:00
hc1027(金幣+5): 非常感謝 2011-05-30 19:55:39
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這個(gè)其實(shí)很難說(shuō)，基因表達(dá)量高只能說(shuō)明合成的多肽鏈數(shù)量比較多，但是從多肽鏈到具有活性的酶還需要很復(fù)雜的修飾折疊等等~~ 比方說(shuō)你表達(dá)是糖蛋白，就存在糖基化的問(wèn)題，糖基化不足或者過(guò)糖基化都會(huì)對(duì)酶活力有影響，多肽鏈合成很多但是糖基化不足當(dāng)然酶活力不會(huì)隨基因表達(dá)量成正比~~ 再比如說(shuō)大腸桿菌有包涵體的問(wèn)題，包涵體形式的蛋白是沒(méi)有生物活性的~~~~ 我覺(jué)得有可能是你的表達(dá)系統(tǒng)的原因，因?yàn)槎嚯逆湹男揎椪郫B主要是你的表達(dá)系統(tǒng)的作用而不是基因編碼的作用~~ |
6樓2011-05-30 18:50:36
beautybanana
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【答案】應(yīng)助回帖
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dhd997(金幣+5, EPI+1): 樓主說(shuō)有用哦 2011-05-31 08:18:50
dhd997(金幣+5, EPI+1): 樓主說(shuō)有用哦 2011-05-31 08:18:50
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發(fā)表個(gè)人觀點(diǎn)： 一、基因表達(dá)量和酶活性是兩個(gè)獨(dú)立的概念，所以要分清楚，不要認(rèn)為表達(dá)量高酶活性就高，表達(dá)量低酶活性就低 二、研究基因表達(dá)量和酶活性之間的關(guān)系，要以你所研究?jī)?nèi)容事實(shí)為分析對(duì)象，要把兩者分開(kāi)來(lái)研究，首先研究基因的表達(dá)情況，是高還是低，如果是定量的話，要用數(shù)據(jù)描述一下這個(gè)基因在條件變化時(shí)是怎樣變化的，其次是在了解這個(gè)基因產(chǎn)物即蛋白的功能基礎(chǔ)上要做蛋白功能的變化研究，然后把這2者聯(lián)系起來(lái)加以分析，是正相關(guān)還是負(fù)相關(guān)或是其他情況就有待于你自己的分析了，最后在實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上得出你的實(shí)驗(yàn)結(jié)論，當(dāng)然還可以通過(guò)其他方法對(duì)你的實(shí)驗(yàn)結(jié)論加以進(jìn)一步的驗(yàn)證是最好的。不管怎么樣，分析和討論是少不了的也是必要的，關(guān)鍵的就是你自己要認(rèn)真的去做就會(huì)有收獲~  亂侃，別介意啊~祝實(shí)驗(yàn)順利噢~  |
8樓2011-05-30 22:07:57
cdl007
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4樓2011-05-30 18:43:07
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10樓2011-05-30 23:26:54
【答案】應(yīng)助回帖
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amisking(金幣+2): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2011-05-30 19:48:14
hc1027(金幣+4): 謝謝 2011-05-30 19:56:34
amisking(金幣+2): 鼓勵(lì)應(yīng)助 2011-05-30 19:48:14
hc1027(金幣+4): 謝謝 2011-05-30 19:56:34
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恩 沒(méi)做過(guò)這個(gè) 但是說(shuō)點(diǎn)自己的看法 這個(gè)酶的表達(dá)量高 說(shuō)明對(duì)這個(gè)酶的需求量多 但不代表這個(gè)酶的活性就是高的 酶活的定義是在特定條件下，1分鐘內(nèi)轉(zhuǎn)化1微摩爾底物，或者底物中1微摩爾有關(guān)基團(tuán)所需的酶量。 說(shuō)的簡(jiǎn)單點(diǎn) 同樣底物需要表達(dá)量很高的酶才能作用完畢，是不是說(shuō)明這個(gè)酶的活力是低的呢 |
7樓2011-05-30 19:16:19
hc1027
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9樓2011-05-30 22:49:59
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