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fanfei211923鐵蟲 (初入文壇)
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大腸桿菌表達(dá)42kd的蛋白，蛋白電泳顯示只有35kd，測酶活還比較高，這是怎么回事兒呢？
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| 最近表達(dá)一個蛋白，大小約為42kd，用載體pET28(a)，轉(zhuǎn)入到BL21(DE3)表達(dá),37°C,1mMIPTG誘導(dǎo)后，sds-page電泳結(jié)果顯示只有在35kd處有明顯條帶，和理論值差7KD,且條帶比較深，用超聲破壁測酶活，和文獻(xiàn)相比較酶活又比較高,這是怎么回事兒呢，之前一直沒有條帶，重新連接、轉(zhuǎn)化，才有條帶竟和理論值差這么多，真是一波三折啊，希望有經(jīng)驗的蟲友們幫小弟解決一下這個難題。 |
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