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青色的知了木蟲 (小有名氣)
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[求助]
目的片段和T1載體連接后轉入感受態(tài)細胞涂板子總不長菌……
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代朋友問的，不是很懂，希望大家能給點意見，不甚感激 目的片段和T1載體連接后轉入感受態(tài)細胞涂板子總不長菌……是為什么呢？ |
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quiller2000
木蟲 (著名寫手)
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【答案】應助回帖
★ ★ ★
dhd997(金幣+3): 鼓勵交流 2011-08-27 09:26:31
青色的知了(金幣+5): 2011-08-27 19:46:48
dhd997(金幣+3): 鼓勵交流 2011-08-27 09:26:31
青色的知了(金幣+5): 2011-08-27 19:46:48
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首先排除樓上所指出的問題 其次要做好對照，現(xiàn)在不長菌落，至少要在做轉化的時候轉一個同你的T-vector相同抗性的質粒看看是不是你的感受態(tài)有問題了，同時更精細的，你需要計算你的感受態(tài)效率。 如果這些都沒有問題，你應該看看你的片段是不是需要加A，或者說是不是KOD之類的PCR系統(tǒng)，如果PCR產(chǎn)物是平端的，是沒有辦法直接進行TA克隆的！ PS，如果是這樣，你的T-vector倒是質量不錯啊，呵呵 |
4樓2011-08-26 23:17:13
2樓2011-08-26 22:19:29
wanhscn
木蟲 (職業(yè)作家)
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3樓2011-08-26 22:28:16
無蹤無影
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5樓2012-05-21 10:01:42
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