 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2049 | 回復(fù): 9 | ||
junxiao0320金蟲 (小有名氣)
學(xué)生
|
[求助]
表達(dá)載體雙酶切
|
| 本人從T載體上切下目的片段，連到表達(dá)載體pQE30上用的是ECORI和SPHI但是酶切就是很難切下來 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有85人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 構(gòu)建pBI121表達(dá)載體，目的基因與載體連接不上
已經(jīng)有54人回復(fù)
- 表達(dá)載體的構(gòu)建
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 表達(dá)載體構(gòu)建的相關(guān)問題
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 雙酶切連接表達(dá)載體，兩個(gè)月都沒做出來，問題到底出在哪里呢~？求指點(diǎn)
已經(jīng)有52人回復(fù)
- 為什么我做的酶切連接總是不長斑呢？
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 【求助/交流】相鄰酶切位點(diǎn)的雙酶切
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】雙酶切質(zhì)粒后，目的條帶淺且前方有模糊亮帶
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【求助/交流】連接表達(dá)載體PET-28A失敗原因
已經(jīng)有23人回復(fù)
blackrose8089
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
- MolEPI: 16
- 應(yīng)助: 100 (初中生)
- 貴賓: 0.11
- 金幣: 10638.6
- 散金: 155
- 紅花: 30
- 沙發(fā): 6
- 帖子: 3702
- 在線: 790.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 614948
- 注冊(cè): 2008-09-28
- 專業(yè): 植物學(xué)研究的新技術(shù)、新方
2樓2011-12-20 11:58:18
yuxia82012
木蟲 (著名寫手)
- MolEPI: 3
- 應(yīng)助: 20 (小學(xué)生)
- 金幣: 4980
- 散金: 2225
- 紅花: 2
- 帖子: 1340
- 在線: 426.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 781881
- 注冊(cè): 2009-05-29
- 性別: GG
- 專業(yè): 有機(jī)合成
3樓2011-12-20 14:31:15
panda73
金蟲 (小有名氣)
- MolEPI: 3
- 應(yīng)助: 80 (初中生)
- 金幣: 1201.3
- 散金: 44
- 紅花: 2
- 帖子: 191
- 在線: 42.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 985964
- 注冊(cè): 2010-03-30
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
1949stone(金幣+3): 值得注意 2011-12-20 23:55:09
junxiao0320: 金幣+4 2012-03-16 22:03:46
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
1949stone(金幣+3): 值得注意 2011-12-20 23:55:09
junxiao0320: 金幣+4 2012-03-16 22:03:46
|
你用的是哪個(gè)公司的酶，雙酶切時(shí)要注意下列多種因素： Buffer是否兼容；酶量是否足夠（不同公司在定義酶的活性單位時(shí)用的底物并不完全相同，因而即使相同名字的酶，如來自不同的公司，使用量也不盡相同，根據(jù)酶單位定義的底物可以進(jìn)行大致的估算）；控制酶切體系的甘油濃度（小于10%）；當(dāng)然質(zhì)粒的質(zhì)量也很重要。 |
4樓2011-12-20 21:33:30
lxj341401
至尊木蟲 (著名寫手)
- MolEPI: 58
- 應(yīng)助: 388 (碩士)
- 貴賓: 0.238
- 金幣: 17138.7
- 紅花: 43
- 帖子: 2251
- 在線: 712.4小時(shí)
- 蟲號(hào): 111074
- 注冊(cè): 2005-11-20
- 專業(yè): 生物化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
1949stone(金幣+2): 支持 2011-12-20 23:55:26
junxiao0320: 金幣+2 2012-03-16 22:03:56
junxiao0320: 金幣+3 2012-03-18 14:53:56
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
1949stone(金幣+2): 支持 2011-12-20 23:55:26
junxiao0320: 金幣+2 2012-03-16 22:03:56
junxiao0320: 金幣+3 2012-03-18 14:53:56
| 雙酶切找個(gè)兼容的Buffer很重要，如果找不到能提供兩個(gè)酶50%活力的buffer，一個(gè)辦法是增加酶量和酶切時(shí)間，但可能出現(xiàn)星號(hào)活力，還有一個(gè)辦法就是分兩次單酶切，各選擇最高活性的buffer，這個(gè)辦法可行，就是麻煩點(diǎn)。 |
5樓2011-12-20 22:41:59
catq
新蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 22.8
- 帖子: 24
- 在線: 5.3小時(shí)
- 蟲號(hào): 1635470
- 注冊(cè): 2012-02-22
- 專業(yè): 生物信息學(xué)
6樓2012-03-14 20:24:05
junxiao0320
金蟲 (小有名氣)
學(xué)生
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 559.1
- 散金: 28
- 紅花: 1
- 帖子: 171
- 在線: 66.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 1097534
- 注冊(cè): 2010-09-13
- 性別: MM
- 專業(yè): 獸醫(yī)傳染病學(xué)
7樓2012-03-15 10:50:29
blackrose8089
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
- MolEPI: 16
- 應(yīng)助: 100 (初中生)
- 貴賓: 0.11
- 金幣: 10638.6
- 散金: 155
- 紅花: 30
- 沙發(fā): 6
- 帖子: 3702
- 在線: 790.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 614948
- 注冊(cè): 2008-09-28
- 專業(yè): 植物學(xué)研究的新技術(shù)、新方
8樓2012-03-15 13:38:46
9樓2012-03-15 17:46:11
10樓2012-03-15 17:50:07
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 junxiao0320 的主題更新
| 10 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿天津大學(xué)化學(xué)工藝專業(yè)（081702）315分求調(diào)劑 +6 | yangfz 2026-03-17 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 268求調(diào)劑 +7 | 好運(yùn)連綿不絕 2026-03-12 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +4 | 是Lupa啊 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 08工科 320總分 求調(diào)劑 +4 | 梨花珞晚風(fēng) 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)調(diào)劑0703 +8 | 啊我我的 2026-03-11 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑 +6 | 妮妮ninicgb 2026-03-15 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 283求調(diào)劑 +10 | 小樓。 2026-03-12 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 326求調(diào)劑 +3 | mlpqaz03 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研]
 機(jī)械專碩調(diào)劑
+3
|
笨笨兔子 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 070305求調(diào)劑 +3 | mlpqaz03 2026-03-14 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 中科大材料專碩319求調(diào)劑 +3 | 孟鑫材料 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[基金申請(qǐng)] 現(xiàn)在如何回避去年的某一個(gè)專家，不知道名字 +3 | zk200107 2026-03-12 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)一志愿211 總分320求調(diào)劑 +5 | 瑪卡巴卡啊哈 2026-03-11 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 333求調(diào)劑 +3 | 球球古力 2026-03-11 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求b區(qū)學(xué)校調(diào)劑 +3 | 周56 2026-03-11 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 310求調(diào)劑 +3 | 【上上簽】 2026-03-11 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 工科材料085601 279求調(diào)劑 +8 | 困于星晨 2026-03-12 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 一志愿211化學(xué)學(xué)碩310分求調(diào)劑 +8 | 努力奮斗112 2026-03-12 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 0817化學(xué)工程與技術(shù)考研312分調(diào)劑 +3 | T123 tt 2026-03-12 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 化工學(xué)碩306求調(diào)劑 +9 | 42838695 2026-03-12 | 9/450 |
|