 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 2053 | 回復(fù): 9 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
junxiao0320金蟲 (小有名氣)
學(xué)生
|
[求助]
表達(dá)載體雙酶切
|
||
| 本人從T載體上切下目的片段，連到表達(dá)載體pQE30上用的是ECORI和SPHI但是酶切就是很難切下來 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實驗中的趣事：實驗器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗中的趣事：和實驗材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有235人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之小鼠實驗：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實驗之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 構(gòu)建pBI121表達(dá)載體，目的基因與載體連接不上
已經(jīng)有54人回復(fù)
- 表達(dá)載體的構(gòu)建
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 表達(dá)載體構(gòu)建的相關(guān)問題
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 雙酶切連接表達(dá)載體，兩個月都沒做出來，問題到底出在哪里呢~？求指點(diǎn)
已經(jīng)有52人回復(fù)
- 為什么我做的酶切連接總是不長斑呢？
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 【求助/交流】相鄰酶切位點(diǎn)的雙酶切
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】雙酶切質(zhì)粒后，目的條帶淺且前方有模糊亮帶
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【求助/交流】連接表達(dá)載體PET-28A失敗原因
已經(jīng)有23人回復(fù)
lxj341401
至尊木蟲 (著名寫手)
- MolEPI: 58
- 應(yīng)助: 388 (碩士)
- 貴賓: 0.238
- 金幣: 17138.7
- 紅花: 43
- 帖子: 2251
- 在線: 712.4小時
- 蟲號: 111074
- 注冊: 2005-11-20
- 專業(yè): 生物化學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
1949stone(金幣+2): 支持 2011-12-20 23:55:26
junxiao0320: 金幣+2 2012-03-16 22:03:56
junxiao0320: 金幣+3 2012-03-18 14:53:56
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
1949stone(金幣+2): 支持 2011-12-20 23:55:26
junxiao0320: 金幣+2 2012-03-16 22:03:56
junxiao0320: 金幣+3 2012-03-18 14:53:56
| 雙酶切找個兼容的Buffer很重要，如果找不到能提供兩個酶50%活力的buffer，一個辦法是增加酶量和酶切時間，但可能出現(xiàn)星號活力，還有一個辦法就是分兩次單酶切，各選擇最高活性的buffer，這個辦法可行，就是麻煩點(diǎn)。 |
5樓2011-12-20 22:41:59
blackrose8089
鐵桿木蟲 (職業(yè)作家)
- MolEPI: 16
- 應(yīng)助: 100 (初中生)
- 貴賓: 0.11
- 金幣: 10638.6
- 散金: 155
- 紅花: 30
- 沙發(fā): 6
- 帖子: 3702
- 在線: 790.1小時
- 蟲號: 614948
- 注冊: 2008-09-28
- 專業(yè): 植物學(xué)研究的新技術(shù)、新方
2樓2011-12-20 11:58:18
yuxia82012
木蟲 (著名寫手)
- MolEPI: 3
- 應(yīng)助: 20 (小學(xué)生)
- 金幣: 4980
- 散金: 2225
- 紅花: 2
- 帖子: 1340
- 在線: 426.5小時
- 蟲號: 781881
- 注冊: 2009-05-29
- 性別: GG
- 專業(yè): 有機(jī)合成
3樓2011-12-20 14:31:15
panda73
金蟲 (小有名氣)
- MolEPI: 3
- 應(yīng)助: 80 (初中生)
- 金幣: 1201.3
- 散金: 44
- 紅花: 2
- 帖子: 191
- 在線: 42.5小時
- 蟲號: 985964
- 注冊: 2010-03-30
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
1949stone(金幣+3): 值得注意 2011-12-20 23:55:09
junxiao0320: 金幣+4 2012-03-16 22:03:46
感謝參與，應(yīng)助指數(shù) +1
1949stone(金幣+3): 值得注意 2011-12-20 23:55:09
junxiao0320: 金幣+4 2012-03-16 22:03:46
|
你用的是哪個公司的酶，雙酶切時要注意下列多種因素： Buffer是否兼容；酶量是否足夠（不同公司在定義酶的活性單位時用的底物并不完全相同，因而即使相同名字的酶，如來自不同的公司，使用量也不盡相同，根據(jù)酶單位定義的底物可以進(jìn)行大致的估算）；控制酶切體系的甘油濃度（小于10%）；當(dāng)然質(zhì)粒的質(zhì)量也很重要。 |
4樓2011-12-20 21:33:30
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +9 | 冬十三 2026-03-15 | 10/500 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料，紡織，生物（0856、0710），化學(xué)招生啦 +3 | Eember. 2026-03-17 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +8 | 小熊joy 2026-03-14 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 材料工程專碩調(diào)劑 +5 | 204818@lcx 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 344求調(diào)劑 +4 | knight344 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 考研化學(xué)學(xué)碩調(diào)劑，一志愿985 +4 | 張vvvv 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 085601求調(diào)劑 +4 | Du.11 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料專碩274一志愿陜西師范大學(xué)求調(diào)劑 +5 | 薛云鵬 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 東南大學(xué)364求調(diào)劑 +5 | JasonYuiui 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)調(diào)劑0703 +8 | 啊我我的 2026-03-11 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 285求調(diào)劑 +6 | ytter 2026-03-12 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 277材料科學(xué)與工程080500求調(diào)劑 +3 | 自由煎餅果子 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0703 物理化學(xué)調(diào)劑 +3 | 我可以上岸的對?/a> 2026-03-13 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 330求調(diào)劑 +3 | ?醬給調(diào)劑跪了 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 招收0805（材料）調(diào)劑 +3 | 18595523086 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求B區(qū)調(diào)劑 +6 | 邱gl 2026-03-12 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 工科，求調(diào)劑 +3 | 我887 2026-03-11 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 307求調(diào)劑 +5 | 超級伊昂大王 2026-03-12 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 314求調(diào)劑 +7 | 無懈可擊的巨人 2026-03-12 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +3 | 是Lupa啊 2026-03-12 | 3/150 |
|