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曲散人別銀蟲 (初入文壇)
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[求助]
求有關(guān)Heochst 33342/PI雙染色法操作的具體步驟
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各位大蝦： 本人近期準(zhǔn)備做Heochst 33342/PI雙染色法實驗，想請教大家一些具體步驟和注意事項，謝謝！ |
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tonyprague1967
銀蟲 (正式寫手)
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【答案】應(yīng)助回帖
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qinhy(金幣+1, PhEPI+1): 多謝應(yīng)助回帖~ 2011-09-05 19:46:39
曲散人別(金幣+25): 2011-09-06 08:16:25
qinhy(金幣+1, PhEPI+1): 多謝應(yīng)助回帖~ 2011-09-05 19:46:39
曲散人別(金幣+25): 2011-09-06 08:16:25
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這個指標(biāo)很簡單的，你需要檢測的是凋亡吧？你用什么觀察？是熒光顯微鏡還是流式？ 如果熒光顯微鏡的話，可以原位染色，也可以消化后收集細胞染色。 具體方法： 1. 收集細胞（如原位染則棄去培養(yǎng)液），PBS洗滌一次，重懸（如原位染則無需重懸）； 2.用Hoechst33342染液（~10 ug/ml）37度避光染色10-15min后，加PI室溫避光染色5min（濃度可以具體看試劑盒說明，量我記不清了）； 3.上機檢測，選擇熒光顯微鏡的藍光檔。 |
2樓2011-09-05 17:23:15
曲散人別
銀蟲 (初入文壇)
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3樓2011-09-14 10:03:17
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