 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 842 | 回復: 1 | ||
| 本帖產(chǎn)生 1 個 翻譯EPI ，點擊這里進行查看 | ||
huojinlong9287銀蟲 (小有名氣)
|
[求助]
漢譯英 生物學方向
|
|
| 為了構建綠色熒光蛋白AcGFP1基因的原核表達載體pET32a-AcGFP1，并通過誘導使其在大腸桿菌中高效表達，本研究以pIRES-AcGFP1質粒為模板，采用PCR技術特異性擴增綠色熒光蛋白（AcGFP1）基因，并通過酶切和連接使其與原核表達載體pET32a（+）構成重組子，經(jīng)PCR、酶切和測序鑒定后，重組質粒轉化大腸桿菌Rosetta（DE3），用不同濃度的異丙基硫代半乳糖苷（IPTG）誘導表達綠色熒光蛋白，并通過15%SDS-PAGE鑒定。結果顯示重組質粒pET32a-AcGFP1中的AcGFP1序列與Clontech公司的pIRES-AcGFP1質粒的AcGFP1序列完全一致，說明成功構建了含有綠色熒光蛋白AcGFP1的原核表達質粒。pET32a-AcGFP1轉化大腸桿菌感受態(tài)細胞Rosetta（DE3）后，經(jīng)不同濃度的IPTG誘導后均獲得高效表達。SDS-PAGE驗證的目的蛋白相對分子量約為44000Da，與理論預期值相符。 |
回復此樓» 猜你喜歡
304求調劑
已經(jīng)有6人回復
-
材料工程專碩調劑
已經(jīng)有6人回復
-
一志愿天大材料與化工（085600）總分338
已經(jīng)有4人回復
-
085700資源與環(huán)境308求調劑
已經(jīng)有3人回復
-
求材料調劑
已經(jīng)有8人回復
-
294求調劑材料與化工專碩
已經(jīng)有5人回復
-
一志愿華中科技大學，080502，354分求調劑
已經(jīng)有4人回復
-
一志愿吉林大學材料學碩321求調劑
已經(jīng)有6人回復
-
085410人工智能專碩317求調劑（0854都可以）
已經(jīng)有3人回復
-
330求調劑
已經(jīng)有3人回復
【答案】應助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
愛與雨下(金幣+2): 鼓勵一下！~ 2011-09-09 12:08:09
huojinlong9287(金幣+60, 翻譯EPI+1): 翻譯的不完全 2011-09-11 09:22:48
sltmac(金幣+10): 2011-09-15 08:02:01
sltmac(金幣+10): 2011-09-15 08:02:05
sltmac: 歡迎常來本版交流~ 2011-09-15 08:02:14
愛與雨下(金幣+2): 鼓勵一下！~ 2011-09-09 12:08:09
huojinlong9287(金幣+60, 翻譯EPI+1): 翻譯的不完全 2011-09-11 09:22:48
sltmac(金幣+10): 2011-09-15 08:02:01
sltmac(金幣+10): 2011-09-15 08:02:05
sltmac: 歡迎常來本版交流~ 2011-09-15 08:02:14
| The aim of this study was to construct prokaryotic expression vector pET32a-AcGFP1, and its high level expression in E. coli cell. AcGFP1 gene was amplified from vector pIRES-AcGFP1 by PCR method, and was inserted into prokaryotic expression vector pET32a(+). The resulting pET32a-AcGFP1 was transformed into E. coli Rosetta(DE3) for expression followed by induction with isopropyl β-D-thiogalactopyranoside (IPTG). Whole-cell extracts were separated on 15% SDS-PAGE. AcGFP1 gene in pET32a-AcGFP1 was consistent with related gene in pIRES-AcGFP1 from Clontech Ltd, indicating prokaryotic expression vector with AcGFP1 gene was constructed successfully. High level expression was conducted with transformed E. coli Rosetta(DE3) after IPTG induction. A strong induction of a 44 kD protein was detected in SDS-PAGE, which was in correspondence with the theoretic value. |
2樓2011-09-09 11:18:49
相關版塊跳轉
我要訂閱樓主 huojinlong9287 的主題更新
| 2 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 0703化學調劑，求各位老師收留 +9 | 秋有木北 2026-03-14 | 9/450 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 化學工程321分求調劑 +15 | 大米飯！ 2026-03-15 | 18/900 |
|
|
|
[考研] 0817 化學工程 299分求調劑 有科研經(jīng)歷 有二區(qū)文章 +7 | rare12345 2026-03-18 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 331求調劑（0703有機化學 +7 | ZY-05 2026-03-13 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 工科材料085601 279求調劑 +6 | 困于星晨 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考博] 26博士申請 +3 | 1042136743 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料專碩326求調劑 +6 | 墨煜姒莘 2026-03-15 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 211本，11408一志愿中科院277分，曾在中科院自動化所實習 +6 | Losir 2026-03-12 | 7/350 |
|
|
|
[考研]
 11408 一志愿西電，277分求調劑
+3
|
zhouzhen654 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 304求調劑 +5 | 素年祭語 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 283求調劑 +10 | 小樓。 2026-03-12 | 14/700 |
|
|
|
[考研] 277材料科學與工程080500求調劑 +3 | 自由煎餅果子 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 0856專碩279求調劑 +5 | 加油加油！? 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 085601材料工程315分求調劑 +3 | yang_0104 2026-03-15 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 289求調劑 +4 | 這么名字咋樣 2026-03-14 | 6/300 |
|
|
|
[考研] ［0860］321分求調劑，ab區(qū)皆可 +4 | 寶貴熱 2026-03-13 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 329求調劑 +3 | miaodesi 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料專碩350 求調劑 +4 | 王金科 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 工科材料085601 279求調劑 +8 | 困于星晨 2026-03-12 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 070303一志愿西北大學學碩310找調劑 +3 | d如愿上岸 2026-03-13 | 3/150 |
|