 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 3338 | 回復(fù): 17 | |||
[交流]
3‘RACE inner PCR 電泳結(jié)果總是有彌散現(xiàn)象回收條帶不成帶狀什么原因��？ 已有11人參與
|
|||
|
采用65度退火溫度跑兩輪3‘RACE PCR 電泳條帶多條，并且最大的條帶上面很大的彌散帶，用的是TAKARA 3‘RACE試劑盒，設(shè)計(jì)兩條上游特異性引物相差117bp,設(shè)計(jì)原則按照說(shuō)明書(shū)來(lái)的，想問(wèn)問(wèn)做過(guò)3‘RACE的前輩們，這到底什么原因��？圖1為pcr結(jié)果，圖2為切膠回收結(jié)果。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤(rùn)色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有99人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測(cè)：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計(jì)，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測(cè)：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測(cè)重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 蛋白電泳，第二向，溴酚藍(lán)不是一條線，有兩個(gè)向上的凸起，是什么原因造成的啊
已經(jīng)有5人回復(fù)
- pcr 帶好寬啊!苦惱，求助ing!
已經(jīng)有21人回復(fù)
- 菌落PCR篩選
已經(jīng)有17人回復(fù)
- 細(xì)菌RNA提取后跑電泳出現(xiàn)一條暗帶和在泳道中彌散都是什么原因？
已經(jīng)有9人回復(fù)
- PCR電泳，加樣孔很亮，但目的條帶卻很淡，不知道怎么回事？
已經(jīng)有24人回復(fù)
- 流感病毒RT-PCR，電泳老是跑不出條帶~~~糾結(jié)！
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 關(guān)于切膠回收后有質(zhì)粒污染和拼接PCR涂抹裝條帶的問(wèn)題，有點(diǎn)長(zhǎng)，呵呵
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 膠回收產(chǎn)物連接轉(zhuǎn)化后菌液PCR電泳條帶出現(xiàn)問(wèn)題
已經(jīng)有8人回復(fù)
- PCR后電泳條帶異常
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助/交流】PCR產(chǎn)物電泳條帶彌散？？？
已經(jīng)有30人回復(fù)
- 【求助/交流】pcr結(jié)果電泳條帶很淡
已經(jīng)有14人回復(fù)
- 【求助/交流】目的基因PCR后電泳出現(xiàn)多條帶
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】DGGE 膠回收后做PCR沒(méi)有條帶是怎么回事？？急�。�！
已經(jīng)有36人回復(fù)
- 【求助/交流】PCR引物設(shè)計(jì)出來(lái)了，但酶切之后電泳沒(méi)條帶啊
已經(jīng)有18人回復(fù)
linqin1029
新蟲(chóng) (初入文壇)
- MolEPI: 1
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 156.7
- 紅花: 1
- 帖子: 30
- 在線: 26.7小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1095143
- 注冊(cè): 2010-09-10
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
★ ★ ★ ★
小木蟲(chóng)(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖
wanhscn(金幣+3): Good！ 2011-09-09 16:33:02
小木蟲(chóng)(金幣+0.5):給個(gè)紅包，謝謝回帖
wanhscn(金幣+3): Good！ 2011-09-09 16:33:02
|
怎么，我看不了你的圖片啊！ 我提幾點(diǎn)建議吧！ 1、3‘RACE 的引物一般在60度以上，而且兩條引物TM值要相差幾度。以便改變兩輪PCR的退火溫度。 2、兩輪巢式PCR的退火溫度也要有差異，第二輪PCR退火溫度要比第一輪高。以便減少非特異性擴(kuò)增。 3、第一輪的PCR循環(huán)數(shù)25輪就OK拉，以便減少非特異擴(kuò)增。 4、第一輪PCR的產(chǎn)物一般稀釋5~20倍作為第二輪PCR的模板，以便減少非特異的產(chǎn)物模板。 |
2樓2011-09-09 10:00:52
taigongzaici
新蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 325.7
- 散金: 12
- 紅花: 1
- 帖子: 157
- 在線: 19.1小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1115977
- 注冊(cè): 2010-10-07
- 專業(yè): 水產(chǎn)生物遺傳育種學(xué)
3樓2011-09-09 14:55:33
4樓2011-09-09 16:07:14
wanhscn
木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
哲學(xué)@草根
- MolEPI: 26
- 應(yīng)助: 53 (初中生)
- 貴賓: 0.87
- 金幣: 3895.7
- 散金: 877
- 紅花: 27
- 沙發(fā): 14
- 帖子: 3642
- 在線: 526.2小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1376762
- 注冊(cè): 2011-08-22
- 性別: GG
- 專業(yè): 植物遺傳學(xué)
5樓2011-09-09 16:29:51
zheng20089829
木蟲(chóng) (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 2280.9
- 散金: 7
- 帖子: 281
- 在線: 233.3小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 667717
- 注冊(cè): 2008-12-04
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
6樓2011-09-09 17:28:54
wanhscn
木蟲(chóng) (職業(yè)作家)
哲學(xué)@草根
- MolEPI: 26
- 應(yīng)助: 53 (初中生)
- 貴賓: 0.87
- 金幣: 3895.7
- 散金: 877
- 紅花: 27
- 沙發(fā): 14
- 帖子: 3642
- 在線: 526.2小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 1376762
- 注冊(cè): 2011-08-22
- 性別: GG
- 專業(yè): 植物遺傳學(xué)
7樓2011-09-09 18:06:07
8樓2011-09-09 20:11:26
9樓2011-09-09 22:14:50
dhd997
榮譽(yù)版主 (文壇精英)
自由人，我型我秀！
- MolEPI: 5
- 應(yīng)助: 24 (小學(xué)生)
- 貴賓: 4.021
- 金幣: 22094.4
- 散金: 1968
- 紅花: 45
- 沙發(fā): 161
- 帖子: 22410
- 在線: 927.9小時(shí)
- 蟲(chóng)號(hào): 500412
- 注冊(cè): 2008-02-13
- 性別: GG
- 專業(yè): 生物化工與食品化工
- 管轄: 分子生物
10樓2011-09-10 07:50:29
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 納蘭欣光 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 材料專碩274一志愿陜西師范大學(xué)求調(diào)劑 +5 | 薛云鵬 2026-03-13 | 5/250 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +3 | lemonzzn 2026-03-16 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 考研化學(xué)學(xué)碩調(diào)劑，一志愿985 +3 | 張vvvv 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 機(jī)械專碩325，尋找調(diào)劑院校 +3 | y9999 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 085600調(diào)劑 +5 | 漾漾123sun 2026-03-12 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 中科大材料專碩319求調(diào)劑 +3 | 孟鑫材料 2026-03-13 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 復(fù)試調(diào)劑 +3 | 呼呼？~+123456 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 學(xué)碩285求調(diào)劑 +13 | Wisjxn 2026-03-12 | 46/2300 |
|
|
|
[考研] 材料工程,326分，求調(diào)劑 +6 | KRSLSR 2026-03-10 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +5 | 是Lupa啊 2026-03-11 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 求材料調(diào)劑 +5 | 隔壁陳先生 2026-03-12 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿西南交大，材料專碩317求調(diào)劑 +5 | lx8568 2026-03-11 | 5/250 |
|
|
|
[考研] （081700）化學(xué)工程與技術(shù)-298分求調(diào)劑 +12 | 11啦啦啦 2026-03-11 | 35/1750 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +5 | 一定有學(xué)上- 2026-03-12 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 290求調(diào)劑 +7 | ADT 2026-03-12 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 328化工專碩求調(diào)劑 +4 | 。，。，。，。i 2026-03-12 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料301分求調(diào)劑 +5 | Liyouyumairs 2026-03-12 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0856化學(xué)工程280分求調(diào)劑 +4 | shenzxsn 2026-03-11 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 283求調(diào)劑，材料、化工皆可 +8 | 蘇打水7777 2026-03-11 | 10/500 |
|
|
|
[考博] 2026年博士申請(qǐng) +3 | QwQwQW10 2026-03-11 | 3/150 |
|