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710925627

木蟲 (小有名氣)

[交流] sephadex G-25柱 蛋白質(zhì)分離 已有7人參與

小弟現(xiàn)在在做有關(guān)過sephadex-25柱的實驗,望各位前輩不吝賜教關(guān)于如何做sephadex -25的柱子,以及運(yùn)用


PS  小弟做的蛋白質(zhì)質(zhì)量在66000左右
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輝輝集團(tuán)

銀蟲 (正式寫手)


小木蟲(金幣+0.5):給個紅包,謝謝回帖
wanhscn: 鼓勵應(yīng)助回答! 2011-09-15 09:13:02
如何做sephadex -25的柱子?
那么除了你的目的蛋白外還有什么物質(zhì)呢?多大分子量
2樓2011-09-14 16:14:55
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wlt728

鐵桿木蟲 (著名寫手)

★ ★
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包,謝謝回帖
西瓜(金幣+1): 歡迎交流 2011-09-15 13:04:16
G25的分離范圍在1000-5000。我們一般只用于除鹽。分離蛋白的效果不太好。
I am not a hero , but I served with heroes!
3樓2011-09-15 10:35:04
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710925627

木蟲 (小有名氣)

我做的產(chǎn)物里有BSA分子量大概在66000,以及偶聯(lián)物分子量為70000左右,我這樣做的目的是將小分子物質(zhì)分離出去,小分子的分子量為280.
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4樓2011-09-16 09:02:14
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labrat

木蟲 (著名寫手)

★ ★ ★ ★
小木蟲(金幣+0.5):給個紅包,謝謝回帖
西瓜(金幣+3): Good! 2011-09-16 17:43:59
Gel filtration chromatography separates proteins in order of large to small molecules.

In general, large proteins will not enter the gel pores and will elute rapidly from the column in the void volume. Smaller proteins will repeatedly enter and leave the pores of the gel and therefore will remain longer in the column. Hence, proteins will elute in order of decreasing molecular size.

Commercially Available Gel Filtration (GF) Gel Matrix
Gel Type  =  Fractionation Range (molecular weight)
Sephadex G-10 = <700
Sephadex G-25 = 1,000-5,000
Bio-Gel P-60 = 3,000-60,000
Sephadex G-75 = 3,000-70,000
Sephadex G-100 = 4,000-100,000
Bio-Gel P-100 = 5,000-100,000
Sephadex G-200 = 5,000-250,000
Bio-Gel P-200 = 30,000-200,000
Sephacryl S-300 = 10,000-1,500,000
Sepharose 2B = 70,000-40,000,000
5樓2011-09-16 11:14:51
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710925627

木蟲 (小有名氣)

引用回帖:
2樓: Originally posted by 輝輝集團(tuán) at 2011-09-14 16:14:55:
如何做sephadex -25的柱子?
那么除了你的目的蛋白外還有什么物質(zhì)呢?多大分子量

我做的產(chǎn)物里有BSA分子量大概在66000,以及偶聯(lián)物分子量為70000左右,我這樣做的目的是將小分子物質(zhì)分離出去,小分子的分子量為280.
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6樓2011-09-20 09:11:13
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710925627

木蟲 (小有名氣)

引用回帖:
5樓: Originally posted by labrat at 2011-09-16 11:14:51:
Gel filtration chromatography separates proteins in order of large to small molecules.

In general, large proteins will not enter the gel pores and will elute rapidly from the column in the voi ...

那具體怎么裝這個柱子啊   小弟我沒有裝過  不知道大蝦能否指點小弟一二
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7樓2011-09-20 09:12:05
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輝輝集團(tuán)

銀蟲 (正式寫手)


小木蟲(金幣+0.5):給個紅包,謝謝回帖
引用回帖:
6樓: Originally posted by 710925627 at 2011-09-20 09:11:13:
我做的產(chǎn)物里有BSA分子量大概在66000,以及偶聯(lián)物分子量為70000左右,我這樣做的目的是將小分子物質(zhì)分離出去,小分子的分子量為280.

從分離原理來講 是可以的哈
8樓2011-09-20 10:50:23
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冼亮淀粉酶

專家顧問 (知名作家)

生物大分子降解酶


小木蟲(金幣+0.5):給個紅包,謝謝回帖
分子篩裝柱的問題已解決,請查閱論壇舊帖。
流星來時我許了個愿,愿我有吃有喝還有舒服的豬圈。討厭發(fā)帖前不搜索論壇重復(fù)發(fā)帖和僅把論壇當(dāng)解決問題工具,久不看論壇一來就提問者,寧棄EPI和VIP也不回帖。
9樓2011-09-20 19:50:59
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710925627

木蟲 (小有名氣)

引用回帖:
9樓: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2011-09-20 19:50:59:
分子篩裝柱的問題已解決,請查閱論壇舊帖。

我沒有檢索到相關(guān)的信息,不知大蝦可否發(fā)我一篇啊。。。。。
710925627@qq.com
點點滴滴做起,點點滴滴收獲。
10樓2011-09-28 14:16:04
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