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初秋的天

銀蟲(chóng) (初入文壇)

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[交流] pcr 不懂�。�！已有7人參與

各位大俠：
小弟不才，
定量PCR一般不進(jìn)行長(zhǎng)片段的擴(kuò)增，所以一般不需要進(jìn)行延伸時(shí)間的調(diào)整。如必須調(diào)整，也務(wù)必確保數(shù)據(jù)收集步奏至少30s

時(shí)間為什么至少30s?

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1樓 2011-09-19 23:47:29

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清風(fēng)寨

銀蟲(chóng) (小有名氣)

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可是為什么不能PCR長(zhǎng)片段呢加入增加延伸時(shí)間行不行呢

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冷風(fēng)過(guò)心變熱

6樓2011-09-24 10:31:50

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gaoyang636

木蟲(chóng) (著名寫手)

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wanhscn(金幣+3): 鼓勵(lì)應(yīng)助！ 2011-09-24 08:35:11

定量PCR 擴(kuò)增的片段一般很短，200bp以內(nèi)，30s不但能保證把這片段給延伸完畢，而且還得給熒光染色一定的時(shí)間去結(jié)合雙鏈DNA，發(fā)熒光，并被機(jī)器捕捉，用做定量標(biāo)準(zhǔn)。

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3樓2011-09-20 10:05:19

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cloverplm

金蟲(chóng) (小有名氣)

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引用回帖:

3樓: Originally posted by gaoyang636 at 2011-09-20 10:05:19:
定量PCR 擴(kuò)增的片段一般很短，200bp以內(nèi)，30s不但能保證把這片段給延伸完畢，而且還得給熒光染色一定的時(shí)間去結(jié)合雙鏈DNA，發(fā)熒光，并被機(jī)器捕捉，用做定量標(biāo)準(zhǔn)。

樓上的回答很對(duì)哦，探針和染料結(jié)合目的片段需要時(shí)間。所以要30s.

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凈——靜——競(jìng)——進(jìn)

4樓2011-09-23 19:50:06

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