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芥末蠶豆銅蟲 (初入文壇)
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[求助]
大腸桿菌ET12567
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我將構(gòu)建好的一個質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌ET12567,用的是CaCl2法制備ET12567感受態(tài)，菌液PCR驗證、提取質(zhì)粒酶切驗證均正確，將驗證正確的菌用20％甘油保存在－20度； 此時問題出現(xiàn)了：將甘油保藏管菌液重新接LB小試管（含抗性），提質(zhì)粒，但是此時卻見不到質(zhì)粒的條帶了，Why？（ps:提質(zhì)粒用的試劑是別人剛剛提過質(zhì)粒的，應(yīng)該沒問題；LB小試管菌長得很好很正常）。我也試過將甘油保藏管菌液先在LB（含同樣抗生素）平板活化，然后再接小試管提質(zhì)粒，結(jié)果電泳也沒見到我所要的質(zhì)粒條帶（PS：電泳和別人一起跑的，別人的有條帶，電泳應(yīng)該是沒問題的） 有沒有高手比較連接這個菌種！非常感謝！ |
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7樓2011-09-20 21:49:50
lxj341401
至尊木蟲 (著名寫手)
- MolEPI: 58
- 應(yīng)助: 388 (碩士)
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- 專業(yè): 生物化學(xué)
2樓2011-09-20 07:26:31
芥末蠶豆
銅蟲 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 493.8
- 帖子: 49
- 在線: 17.9小時
- 蟲號: 959015
- 注冊: 2010-03-01
- 性別: MM
- 專業(yè): 微生物學(xué)
3樓2011-09-20 08:52:05
4樓2011-09-20 14:29:14
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