 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 6443 | 回復(fù): 28 | |||||
友誼無限金蟲 (小有名氣)
|
[求助]
如何正確計(jì)算藥代中藥物的提取回收率？
|
||||
|
大家好！ 我正在做藥代動(dòng)力學(xué)中藥物的提取回收率，看了很多文獻(xiàn)，但提取回收率的做法不一，所以想請教大家給予正確的做法。 我是這樣做提取回收率的：1.取一個(gè)濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液（比如8ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)液）100ul，加入空白血漿0.5ml，再加內(nèi)標(biāo)50ul，加少量磷酸后，渦旋混勻。然后加入3ml的乙酸乙酯進(jìn)行萃取，渦旋3min，離心（4000r/min）10min，取一定量的上清液，在45°C水浴中氮?dú)饬鞔蹈桑瑲堅(jiān)昧鲃?dòng)相150ul復(fù)溶，高速離心后，進(jìn)樣30ul。得到藥物與內(nèi)標(biāo)的峰面積分別為A1、A2，R1=A1/A2。 2. 另取8ug/ml的標(biāo)準(zhǔn)液100ul，再加內(nèi)標(biāo)50ul，混勻后于45°C水浴中氮?dú)饬鞔蹈�，殘�(jiān)昧鲃?dòng)相150ul復(fù)溶，高速離心后，進(jìn)樣30ul。得到藥物與內(nèi)標(biāo)的峰面積分別為A3、A4，R2=A3/A4 。 提取回收率的計(jì)算如下： 方法一：R=A1/A3 （直接用藥物峰面積之比計(jì)算） 方法二：R=R1/R2 （用藥物與內(nèi)標(biāo)的比值計(jì)算） 請教各位做藥代動(dòng)力學(xué)的朋友，我所做的藥物提取回收率方法是否正確？ 計(jì)算提取回收率是應(yīng)該用方法一，還是方法二？ 我參考了許多文獻(xiàn)，但做法不一，所以希望大家能給予幫助，非常感謝！ |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 藥代動(dòng)力學(xué)…… | 搖曳的星星 | 問題收集 |
» 猜你喜歡
317求調(diào)劑
已經(jīng)有12人回復(fù)
-
一志愿武漢理工材料工程專碩調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
【考研調(diào)劑】化學(xué)專業(yè) 281分，一志愿四川大學(xué)，誠心求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
324求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
288求調(diào)劑
已經(jīng)有16人回復(fù)
-
317求調(diào)劑
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
287求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
一志愿 西北大學(xué) ，070300化學(xué)學(xué)碩，總分287，雙非一本，求調(diào)劑。
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
求調(diào)劑，一志愿:南京航空航天大學(xué)大學(xué) ，080500材料科學(xué)與工程學(xué)碩，總分289分
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
085600材料與化工
已經(jīng)有8人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 求助，銀杏提取物做藥代動(dòng)力學(xué)，選什么做內(nèi)標(biāo)好？
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 關(guān)于回收率的測定
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 求助 萃取回收率問題
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 加標(biāo)回收率試驗(yàn)，減去對照溶液的體積，怎么加入提取溶劑？
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 含量測定中方法學(xué)驗(yàn)證---回收率的問題 ？？？
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 血漿藥物提取回收率該怎么算
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 樣品量大，且不是同一類樣品，如何做回收率更科學(xué)？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 液質(zhì)提取回收率的問題
已經(jīng)有4人回復(fù)
- 【求助】藥動(dòng)學(xué)回收率高怎么處理
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 【求助】求助+旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀回收率怎么樣變高
已經(jīng)有16人回復(fù)
【答案】應(yīng)助回帖
友誼無限(金幣+2): 2011-09-30 14:24:32
|
方法學(xué)考核時(shí)要考核提取回收率、過程有效率和基質(zhì)效應(yīng)，且待測物和內(nèi)標(biāo)均要考核。 做法舉例： 1 取標(biāo)準(zhǔn)溶液（80ng/ml）10ul，+空白血漿500ul，+內(nèi)標(biāo)（50ng/ml）10ul，混勻，萃取，離心，揮干，以100ul流動(dòng)相復(fù)溶，取20ul進(jìn)樣，得待測物和內(nèi)標(biāo)峰面積分別為A1和B1（待測物和內(nèi)標(biāo)的理論濃度分別為8ng/ml和5ng/ml） 2 取500ul空白血漿，萃取，離心，揮干，流動(dòng)相配制含待測物和內(nèi)標(biāo)的理論濃度分別為8ng/ml和5ng/ml的溶液150ul復(fù)溶之，取20ul進(jìn)樣，得待測物和內(nèi)標(biāo)的峰面積分別為A2和B2 3 流動(dòng)相配制含待測物和內(nèi)標(biāo)的理論濃度分別為8ng/ml和5ng/ml的溶液150ul，取20ul進(jìn)樣，得待測物和內(nèi)標(biāo)峰面積分別為A3和B3 計(jì)算： 提取回收率：待測物=A1/A2 內(nèi)標(biāo)=B1/B2 同類基質(zhì)下的比較，表征加樣 回收率大小 基質(zhì)效應(yīng)：待測物=A2/A3 內(nèi)標(biāo)=B2/B3 不同基質(zhì)下，同樣的理論濃度比較，表征基質(zhì)對測定的影響程度，離子增強(qiáng)或離子抑制程度 過程有效率：待測物=A1/A3 內(nèi)標(biāo)=B2/B3 整個(gè)方法的總體效率 3方面結(jié)合評(píng)價(jià)一個(gè)方法的可靠與否。低、中、高濃度都要以上述辦法評(píng)價(jià)。 以上為我們承接I期臨床藥代動(dòng)力學(xué)或生物等效性研究時(shí)采取的方法學(xué)驗(yàn)證辦法。 從現(xiàn)在的注冊審查要求來看，回收率不一定要多高，能滿足測定靈敏度要求足矣；基質(zhì)效應(yīng)要小，我們實(shí)驗(yàn)室的標(biāo)準(zhǔn)為90-110%，實(shí)踐證明，基質(zhì)效應(yīng)大時(shí)往往測樣量大時(shí)carry over明顯，測定結(jié)果不可靠。 啰嗦半天，希望有所幫助 |
18樓2011-09-28 20:09:09
lihui5456
木蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 5561.9
- 帖子: 91
- 在線: 146.7小時(shí)
- 蟲號(hào): 830254
- 注冊: 2009-08-18
- 專業(yè): 藥物代謝與藥物動(dòng)力學(xué)
【答案】應(yīng)助回帖
|
1 取標(biāo)準(zhǔn)溶液（100ng/ml）10ul，+空白血漿490ul，+內(nèi)標(biāo)（50ng/ml）10ul，加入1Ml有機(jī)溶劑，混勻，萃取，離心，取0.8ml上清，揮干，以100ul流動(dòng)相復(fù)溶，取20ul進(jìn)樣，得待測物和內(nèi)標(biāo)峰面積分別為A1和B1（待測物和內(nèi)標(biāo)的理論濃度分別為2ng/ml和1ng/ml） 2 取490ul空白血漿+10ul標(biāo)準(zhǔn)溶液稀釋用溶劑+10ul內(nèi)標(biāo)溶解用溶劑，加入1Ml有機(jī)溶劑萃取，離心，取0.8ml上清，揮干，流動(dòng)相配制含待測物和內(nèi)標(biāo)的理論濃度分別為2ng/ml和1ng/ml的溶液100ul復(fù)溶之，取20ul進(jìn)樣，得待測物和內(nèi)標(biāo)的峰面積分別為A2和B2 計(jì)算： 提取回收率：待測物=(A1/A2)*(1/0.8)*100% 內(nèi)標(biāo)=(B1/B2)*(1/0.8)*100%該方法能正確反映溶劑的萃取效率極其整個(gè)操作中的提取效率。其中(1/0.8)為提取系數(shù)，是根據(jù)“加入1Ml有機(jī)溶劑，取0.8ml上清”計(jì)算的。 為了更好的模擬生物情況，一般要求加入的標(biāo)準(zhǔn)溶液和內(nèi)標(biāo)體積盡可能的小，但是過小的體積也帶來更大的誤差。對于用水或者甲醇：水=1:1配置的溶液，可以適當(dāng)加大體積，可以適當(dāng)控制在血漿體積的10%以內(nèi)。而對于完全的乙腈、甲醇溶劑，建議控制在1/50以內(nèi)，或者在加入血漿前揮干。 |
25樓2012-05-31 11:47:46
匿名
用戶注銷 (初入文壇)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 309.7
- 散金: 3
- 帖子: 30
- 在線: 8.5小時(shí)
- 蟲號(hào): 0
- 注冊: 2009-04-09
- 專業(yè): 藥物代謝與藥物動(dòng)力學(xué)
10樓2011-09-25 22:18:02
19樓2011-09-28 20:11:48
2樓2011-09-24 14:37:08
友誼無限
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 750.1
- 散金: 48
- 帖子: 116
- 在線: 59.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 1116731
- 注冊: 2010-10-08
- 專業(yè): 藥物代謝與藥物動(dòng)力學(xué)
3樓2011-09-24 16:44:18
4樓2011-09-24 17:15:57
友誼無限
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 750.1
- 散金: 48
- 帖子: 116
- 在線: 59.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 1116731
- 注冊: 2010-10-08
- 專業(yè): 藥物代謝與藥物動(dòng)力學(xué)
5樓2011-09-24 20:41:30
zxq0808
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 5 (幼兒園)
- 金幣: 1111.1
- 散金: 11
- 帖子: 203
- 在線: 92.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 1095694
- 注冊: 2010-09-11
- 性別: MM
- 專業(yè): 藥物代謝與藥物動(dòng)力學(xué)
6樓2011-09-25 00:16:29
陳林霖
至尊木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 45 (小學(xué)生)
- 金幣: 10716.7
- 紅花: 4
- 帖子: 963
- 在線: 512.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 536264
- 注冊: 2008-03-30
- 性別: GG
- 專業(yè): 藥物分析
7樓2011-09-25 14:52:55
友誼無限
金蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 750.1
- 散金: 48
- 帖子: 116
- 在線: 59.2小時(shí)
- 蟲號(hào): 1116731
- 注冊: 2010-10-08
- 專業(yè): 藥物代謝與藥物動(dòng)力學(xué)
8樓2011-09-25 17:54:40
陳林霖
至尊木蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 45 (小學(xué)生)
- 金幣: 10716.7
- 紅花: 4
- 帖子: 963
- 在線: 512.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 536264
- 注冊: 2008-03-30
- 性別: GG
- 專業(yè): 藥物分析
|
這個(gè)問題也困擾我很長時(shí)間，我上面也說錯(cuò)了，步驟1，2都是沒問題的，但計(jì)算方法二我并不認(rèn)同。大部分文獻(xiàn)采用的是方法一。這個(gè)是FDA發(fā)布的指導(dǎo)原則，第5 頁http://wenku.baidu.com/view/f36635d1240c844769eaee00.html |
9樓2011-09-25 18:41:55
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 友誼無限 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿南昌大學(xué)，327分，材料與化工085600 +8 | Ncdx123456 2026-03-19 | 8/400 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿武理材料工程348求調(diào)劑 +3 | ￣^￣゜汗 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +5 | Mqqqqqq 2026-03-19 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 261求B區(qū)調(diào)劑，科研經(jīng)歷豐富 +3 | 牛奶很忙 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 環(huán)境工程調(diào)劑 +9 | 大可digkids 2026-03-16 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 286分人工智能專業(yè)請求調(diào)劑愿意跨考！ +3 | lemonzzn 2026-03-17 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085410人工智能專碩317求調(diào)劑（0854都可以） +4 | xbxudjdn 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿福大288有機(jī)化學(xué)，求調(diào)劑 +3 | 小木蟲200408204 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿985，本科211，0817化學(xué)工程與技術(shù)319求調(diào)劑 +10 | Liwangman 2026-03-15 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑，求各位老師收留 +10 | 秋有木北 2026-03-14 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +4 | 冬十三 2026-03-18 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料專碩306英一數(shù)二 +10 | z1z2z3879 2026-03-16 | 13/650 |
|
|
|
[考研]
 0854，計(jì)算機(jī)類招收調(diào)劑
+3
|
胡辣湯放糖 2026-03-15 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 277調(diào)劑 +5 | 自由煎餅果子 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +3 | 淇ya_~ 2026-03-17 | 5/250 |
|
|
|
[考研] [導(dǎo)師推薦]西南科技大學(xué)國防/材料導(dǎo)師推薦 +3 | 尖角小荷 2026-03-16 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 326求調(diào)劑 +4 | 諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)覬?/a> 2026-03-15 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 304求調(diào)劑 +3 | 曼殊2266 2026-03-14 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求老師收留調(diào)劑 +4 | jiang姜66 2026-03-14 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿哈工大材料324分求調(diào)劑 +5 | 閆旭東 2026-03-14 | 5/250 |
|