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迷失人魚(yú)金蟲(chóng) (小有名氣)
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多基因表達(dá)？？
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求高手指點(diǎn)�。� 一個(gè)質(zhì)粒中插入4個(gè)或更多基因片段，每個(gè)基因前都有RBS。這四個(gè)基因全部能夠很好的表達(dá)么？會(huì)不會(huì)最后一兩個(gè)基因不能表達(dá)？ 或者，能不能推薦些參考文獻(xiàn)，綜述之類(lèi)的學(xué)習(xí)一下呢？ 謝謝��！不勝感激~~ |
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【答案】應(yīng)助回帖
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adslye(金幣+2): 鼓勵(lì)交流~國(guó)慶快樂(lè)~ 2011-09-30 17:20:25
adslye(金幣+2): 鼓勵(lì)交流~國(guó)慶快樂(lè)~ 2011-09-30 17:20:25
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首先，插入的基因越多，你的載體就越不穩(wěn)定。 其次你的目的是想表達(dá)一個(gè)融合蛋白呢還是四個(gè)單獨(dú)的蛋白。如果是前者在一個(gè)啟動(dòng)子下依次連接四個(gè)基因，只需在第一個(gè)基因前加RBS，最后一個(gè)基因中設(shè)置終止密碼子。如果是后者，你需要設(shè)置四個(gè)表達(dá)相關(guān)的元件，什么啟動(dòng)子啦、RBS、終止子等，甚至可能分別需要信號(hào)肽。要是這樣做最可能的結(jié)果可能是第一個(gè)（和第二個(gè)）蛋白有表達(dá)，其他的無(wú)表達(dá)。 |
2樓2011-09-30 10:05:44
迷失人魚(yú)
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3樓2011-09-30 17:03:01
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4樓2011-10-01 10:33:55
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