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little-ant新蟲 (小有名氣)
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[求助]
我的藥HPLC對稱因子總是不滿足藥典要求，求助各位大俠指教一下！拜托！
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我是新手，剛接觸hplc，在摸索一個自己實驗室合成的新藥（單一化合物）的液相條件，C18色譜柱，樣品用純甲醇溶，流動相甲醇-水，1ml/min，但出現(xiàn)主峰分叉的情況，不要預(yù)柱測的話峰不分叉但峰都前沿，換別的柱子后（有接預(yù)柱）沒有出現(xiàn)峰分叉，請問這些情況是否說明我的柱子柱頭污染或塌陷導(dǎo)致的峰分叉？？？另外我用流動相溶解樣品后測，峰型改善很多，無分叉或肩峰現(xiàn)象，但對稱因子不滿足要求，試過在流動相中加酸或鹽，無論樣品用純甲醇溶還是用流動相溶，都還是得不到滿意結(jié)果，請各位大俠說說我該怎么辦呀，跪求各位的建議��！ 小弟拜謝了！！ |
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copydog
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4樓2011-09-30 23:16:50
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★
wtf66(金幣+3): 謝謝參與 2011-09-30 23:23:59
little-ant(金幣+1): 2011-10-01 01:07:30
wtf66(金幣+3): 謝謝參與 2011-09-30 23:23:59
little-ant(金幣+1): 2011-10-01 01:07:30
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1）首先你要確定，你所測得化合物是否真的是一純的單一化合物 2）如果純化合物的話，可不用預(yù)柱 3）以苯的甲醇溶液做試驗樣品，用的甲醇水（比例可在40-60%之間調(diào)節(jié)，使保留時間在15-20分鐘左右），看看苯的峰是否分叉，如果也分叉，則說明你的柱子有問題，如果苯不分叉，則可能是你的樣品或流動相體系有問題。 4)對稱因子，可根據(jù)樣品的性質(zhì)（酸、堿等），調(diào)節(jié)流動相可以改善。 |
2樓2011-09-30 22:56:49
copydog
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3樓2011-09-30 23:15:36
ronzelau
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【答案】應(yīng)助回帖
★
karl2100(金幣+1): 3Q 2011-10-01 20:36:06
karl2100:編輯內(nèi)容 2011-10-01 20:36
karl2100(金幣+1): 3Q 2011-10-01 20:36:06
karl2100:編輯內(nèi)容 2011-10-01 20:36
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1、你這個情況應(yīng)該是保護住臟了，建議更換柱芯。 2、關(guān)于對稱因子，外標法測定含量時盡量做到0.95-1.05的要求，根據(jù)化合物結(jié)構(gòu)加入合適的添加劑可以解決不對稱的問題，或者改用封端色譜柱。 3.你說的合成藥物的液相條件，估計是測定有關(guān)物質(zhì)，可以不必死守0.95-1.05之規(guī)定。專屬性才最重要，但也與對稱因子相關(guān)。 [ Last edited by karl2100 on 2011-10-1 at 20:36 ] |
5樓2011-10-01 00:09:43
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