 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 4313 | 回復(fù): 17 | |||
| 本帖產(chǎn)生 1 個(gè) BioEPI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
[交流]
求助：純化蛋白遇到包涵體了，尿素怎么用？
|
|||
|
純化大腸桿菌重組蛋白，遇到包涵體了，超聲裂解不能澄清，離心后蛋白全在菌體沉淀里面 低溫誘導(dǎo)貌似沒(méi)什么效果。。。。。。請(qǐng)問(wèn)大家用什么方法釋放出來(lái)包涵體呢？ 有人用8M尿素處理超聲成功破裂包涵體 我的問(wèn)題是，8M的尿素怎么去掉呢？我們的蛋白是GST標(biāo)簽的，是打算用GST瓊脂糖柱子純化的。。。。我不知道8M的尿素對(duì)柱子有沒(méi)有什么影響呢？ |
回復(fù)此樓» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
花生剝了殼» 猜你喜歡
299求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
一志愿北京理工大學(xué)本科211材料工程294求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
300求調(diào)劑，材料科學(xué)英一數(shù)二
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
招收生物學(xué)/細(xì)胞生物學(xué)調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
070305高分子化學(xué)與物理 304分求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
289求調(diào)劑
已經(jīng)有13人回復(fù)
-
一志愿哈爾濱工業(yè)大學(xué)材料與化工方向336分
已經(jīng)有9人回復(fù)
-
081200-11408-276學(xué)碩求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
調(diào)劑求院校招收
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
調(diào)劑310
已經(jīng)有8人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 蛋白包涵體透析后雜蛋白很多，請(qǐng)教原因
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 包涵體洗滌后8M尿素不溶解
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助】包涵體表達(dá)與可溶性表達(dá)
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】急！如何分離未徹底破碎的細(xì)胞及包涵體？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于millpore超濾離心管
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】如何制備干凈的包涵體
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助/交流】原核表達(dá)蛋白純化
已經(jīng)有29人回復(fù)
» 搶金幣啦！回帖就可以得到:
-
中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)環(huán)境與可持續(xù)發(fā)展研究所博士后招聘
+1/281
-
武漢征男友
+1/268
-
汕頭大學(xué) 海洋科學(xué)-生物學(xué)-生物醫(yī)藥大量接受調(diào)劑
+1/192
-
下一站，欽州
+1/80
-
西南交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院招收生物醫(yī)學(xué)工程和材料與化工專業(yè)碩士研究生
+1/74
-
刪帖
+2/52
-
首都師范大學(xué)招收材料與化工專碩調(diào)劑生--中科院半導(dǎo)體所共培
+1/40
-
沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)生物與醫(yī)藥專碩招收調(diào)劑生�。。。。。。。。。�
+1/37
-
上海大學(xué) “生物有機(jī)電子材料及器件”團(tuán)隊(duì)碩士、博士研究生招聘
+1/36
-
南京林業(yè)大學(xué)-國(guó)家級(jí)青年人才團(tuán)隊(duì) 招2026級(jí)博士、碩士（合成化學(xué)、植物化學(xué)方向）
+1/20
-
中科院和北京工商大學(xué)招收2026博士（化學(xué)背景）
+1/13
-
同濟(jì)大學(xué)環(huán)境學(xué)院 肖倩特聘研究員課題組 招聘碩士/博士（長(zhǎng)期有效）
+1/11
-
北京某研究院結(jié)構(gòu)生物學(xué)相關(guān)專業(yè)接收調(diào)劑研究生
+1/9
-
寧夏大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院魏逸彬研究員課題組招聘啟事
+1/7
-
武漢紡織大學(xué)沈愛國(guó)教授團(tuán)隊(duì)招收化學(xué)、生物、材料專業(yè)研究生
+1/5
-
南開大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院王鑫教授課題組招收申請(qǐng)考核制博士生
+1/4
-
5科大招收材料專業(yè)碩士
+1/3
-
金屬材料先進(jìn)連接技術(shù)
+1/3
-
CD40L抗體如何調(diào)控免疫應(yīng)答？
+1/3
-
武漢理工大學(xué)船海與能源動(dòng)力工程學(xué)院劉鵬飛院士團(tuán)隊(duì)博士后招聘啟事
+1/3
11樓2012-04-27 17:17:53
18853850850
金蟲 (正式寫手)
- BioEPI: 1
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 1283.4
- 帖子: 301
- 在線: 116.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 1189069
btx362237729(金幣+3): 非常感謝 2011-10-04 13:36:46
amisking(BioEPI+1): 鼓勵(lì)應(yīng)助。 2011-10-04 18:51:24
amisking(BioEPI+1): 鼓勵(lì)應(yīng)助。 2011-10-04 18:51:24
|
上柱之前先進(jìn)行包涵體的復(fù)性 （1）將溶解的包涵體裝入已經(jīng)處理好的透析袋中，封好口，。 （2）放于4℃復(fù)性緩沖液中進(jìn)行梯度復(fù)性，間隔時(shí)間為10-12h，復(fù)性緩沖液的濃度分別為：4.5mmol/L、3.5mmol/L、2.5mmol/L、1.5mmol/L、0.5mmol/L、0mmol/L。 （3）取出復(fù)性后的蛋白溶液12000rpm離心20min，取上清，分別取少量的上清和少許的沉淀進(jìn)行SDS-PAGE，檢測(cè)復(fù)性情況。 復(fù)性緩沖液：PBS 1mmol/LEDTA +尿素 |
2樓2011-10-04 13:16:47
18853850850
金蟲 (正式寫手)
- BioEPI: 1
- 應(yīng)助: 3 (幼兒園)
- 金幣: 1283.4
- 帖子: 301
- 在線: 116.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 1189069
3樓2011-10-04 13:17:59
★ ★ ★ ★
amisking(金幣+4): 鼓勵(lì)應(yīng)助。 2011-10-04 18:51:31
amisking(金幣+4): 鼓勵(lì)應(yīng)助。 2011-10-04 18:51:31
|
復(fù)性緩沖液的濃度分別為：4.5mmol/L、3.5mmol/L、2.5mmol/L、1.5mmol/L、0.5mmol/L、0mmol/L。 復(fù)性緩沖液：PBS 1mmol/LEDTA +尿素 抱歉這個(gè)濃度沒(méi)看懂呢，是指的尿素的濃度嗎？ 聽說(shuō)尿素處理后GST標(biāo)簽蛋白的結(jié)構(gòu)被破壞得很嚴(yán)重，復(fù)性效果也不好，不知道是不是真的？ 復(fù)性就指去除尿素，然后蛋白質(zhì)自己折疊？導(dǎo)師說(shuō)我們這個(gè)蛋白就是個(gè)直的，不需要折疊，那么主要就要復(fù)性GST了 |
4樓2011-10-04 13:30:32
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 295求調(diào)劑 +4 | wei-5 2026-03-26 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +10 | Micky11223 2026-03-25 | 14/700 |
|
|
[考研] 312，生物學(xué)求調(diào)劑 +3 | 小譯同學(xué)abc 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 085600，材料與化工321分求調(diào)劑 +9 | 大饞小子 2026-03-28 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +6 | 蘆lty 2026-03-25 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +9 | lin0039 2026-03-26 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑推薦 材料 304 +15 | 荷包蛋hyj 2026-03-26 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 266分求材料化工冶金礦業(yè)等專業(yè)的調(diào)劑 +4 | 哇呼哼呼哼 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研]
 一志愿 西北大學(xué) 總分282 英語(yǔ)一62 求調(diào)劑
+7
|
18419759900 2026-03-25 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 315調(diào)劑 +4 | 0860求調(diào)劑 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[論文投稿] Journal of Mechanical Science and Technology +3 | Russ_ss 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿吉大071010，316分求調(diào)劑 +3 | xgbiknn 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 321求調(diào)劑 +6 | Ymlll 2026-03-24 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 329求調(diào)劑 +5 | 1() 2026-03-22 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 中國(guó)科學(xué)院深圳先進(jìn)技術(shù)研究院-光纖傳感課題組招生-中國(guó)科學(xué)院大學(xué)、深圳理工大學(xué)聯(lián)培 +5 | YangTyu1 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 271求調(diào)劑 +6 | 生如夏花… 2026-03-22 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 352求調(diào)劑 +4 | 大米飯！ 2026-03-22 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 機(jī)械學(xué)碩310分，數(shù)一英一，一志愿211本科雙非找調(diào)劑信息 +3 | @357 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料專碩331求調(diào)劑 +4 | 鮮當(dāng)牛 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 341求調(diào)劑(一志愿湖南大學(xué)070300) +5 | 番茄頭--- 2026-03-22 | 6/300 |
|