 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 4311 | 回復(fù): 17 | |||
| 本帖產(chǎn)生 1 個 BioEPI ，點擊這里進行查看 | |||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點擊這里查看本話題的所有回帖 | |||
[交流]
求助：純化蛋白遇到包涵體了，尿素怎么用？
|
|||
|
純化大腸桿菌重組蛋白，遇到包涵體了，超聲裂解不能澄清，離心后蛋白全在菌體沉淀里面 低溫誘導(dǎo)貌似沒什么效果。。。。。。請問大家用什么方法釋放出來包涵體呢？ 有人用8M尿素處理超聲成功破裂包涵體 我的問題是，8M的尿素怎么去掉呢？我們的蛋白是GST標(biāo)簽的，是打算用GST瓊脂糖柱子純化的。。。。我不知道8M的尿素對柱子有沒有什么影響呢？ |
回復(fù)此樓» 本帖已獲得的紅花（最新10朵）
花生剝了殼» 猜你喜歡
一志愿北化085600材料專碩275|有文章專利｜求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
一志愿華理，數(shù)一英一285求A區(qū)調(diào)劑
已經(jīng)有12人回復(fù)
-
289求調(diào)劑
已經(jīng)有11人回復(fù)
-
食品工程專碩一志愿中海洋309求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
生物學(xué)學(xué)碩，一志愿湖南大學(xué)，初試成績338
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
321求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
343求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
305求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
本科新能源科學(xué)與工程，一志愿華理能動285求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
332求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 蛋白包涵體透析后雜蛋白很多，請教原因
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 包涵體洗滌后8M尿素不溶解
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助】包涵體表達與可溶性表達
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】急！如何分離未徹底破碎的細(xì)胞及包涵體？
已經(jīng)有7人回復(fù)
- 【求助/交流】關(guān)于millpore超濾離心管
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】如何制備干凈的包涵體
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助/交流】原核表達蛋白純化
已經(jīng)有29人回復(fù)
» 搶金幣啦！回帖就可以得到:
-
中國散裂中子源誠聘“AI材料計算”方向博士后/職工
+1/392
-
山東建筑大學(xué) （市政與環(huán)境工程學(xué)院）碩士研究生招生啦 靜電紡絲纖維與鹽水分離應(yīng)用
+1/88
-
武漢工程大學(xué)化環(huán)學(xué)院程老師課題組招收化學(xué)類學(xué)碩、化學(xué)工程與環(huán)境工程專碩調(diào)劑
+2/86
-
焊接專業(yè)應(yīng)屆畢業(yè)生招聘
+1/83
-
濟南大學(xué)水利與環(huán)境學(xué)院趙艷俠簡介
+1/42
-
招收2名土木工程方向碩士研究生
+1/37
-
煙臺大學(xué)精準(zhǔn)材料高等研究院26年材料方向研究生招生
+1/32
-
雙一流大學(xué)湘潭大學(xué)“化工過程模擬與強化”國家地方聯(lián)合工程研究中心招收各類博士生
+1/15
-
浙江大學(xué)光電學(xué)院、極端光學(xué)實驗室 阿秒方向 招聘科研助理2名
+1/13
-
蘇州初創(chuàng)公司誠聘有機合成化學(xué)家
+1/11
-
【博士招生】廣東工業(yè)大學(xué)國家優(yōu)青課題組招收2026年環(huán)境方向博士生
+1/7
-
機械求調(diào)劑 讀研還想學(xué)機械
+1/5
-
昆工 輕工 招收調(diào)劑
+1/5
-
福建師范大學(xué)國家級人才團隊招收2026年博士研究生
+1/4
-
【MP期刊】青年編委招募開啟！加入我們，一起推動材料科學(xué)前沿
+1/4
-
環(huán)境微生物與污染控制研究所招收2026碩士研究生
+1/3
-
青島大學(xué)物理科學(xué)學(xué)院國家級人才團隊招收材料、物理、能源等相關(guān)專業(yè)調(diào)劑碩士研究生
+1/3
-
香港中文大學(xué) 生物醫(yī)學(xué)學(xué)院/組織工程與再生醫(yī)學(xué)研究所 招聘博士后/研究助理
+1/2
-
2026南京林業(yè)大學(xué)雙一流建設(shè)高�！瘜W(xué)工程學(xué)院招收化學(xué)/材料相關(guān)專業(yè)碩士生
+1/2
-
博士招生 | 青島科技大學(xué)（高分子、化學(xué)、材料、力學(xué)、航天、機電工程、計算機仿真）
+1/1
danbomingyue
禁蟲 (正式寫手)
★
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
小木蟲: 金幣+0.5, 給個紅包，謝謝回帖
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
14樓2012-05-10 09:14:44
btx362237729(金幣+3): 非常感謝 2011-10-04 13:36:46
amisking(BioEPI+1): 鼓勵應(yīng)助。 2011-10-04 18:51:24
amisking(BioEPI+1): 鼓勵應(yīng)助。 2011-10-04 18:51:24
|
上柱之前先進行包涵體的復(fù)性 （1）將溶解的包涵體裝入已經(jīng)處理好的透析袋中，封好口，。 （2）放于4℃復(fù)性緩沖液中進行梯度復(fù)性，間隔時間為10-12h，復(fù)性緩沖液的濃度分別為：4.5mmol/L、3.5mmol/L、2.5mmol/L、1.5mmol/L、0.5mmol/L、0mmol/L。 （3）取出復(fù)性后的蛋白溶液12000rpm離心20min，取上清，分別取少量的上清和少許的沉淀進行SDS-PAGE，檢測復(fù)性情況。 復(fù)性緩沖液：PBS 1mmol/LEDTA +尿素 |
2樓2011-10-04 13:16:47
3樓2011-10-04 13:17:59
★ ★ ★ ★
amisking(金幣+4): 鼓勵應(yīng)助。 2011-10-04 18:51:31
amisking(金幣+4): 鼓勵應(yīng)助。 2011-10-04 18:51:31
|
復(fù)性緩沖液的濃度分別為：4.5mmol/L、3.5mmol/L、2.5mmol/L、1.5mmol/L、0.5mmol/L、0mmol/L。 復(fù)性緩沖液：PBS 1mmol/LEDTA +尿素 抱歉這個濃度沒看懂呢，是指的尿素的濃度嗎？ 聽說尿素處理后GST標(biāo)簽蛋白的結(jié)構(gòu)被破壞得很嚴(yán)重，復(fù)性效果也不好，不知道是不是真的？ 復(fù)性就指去除尿素，然后蛋白質(zhì)自己折疊？導(dǎo)師說我們這個蛋白就是個直的，不需要折疊，那么主要就要復(fù)性GST了 |
4樓2011-10-04 13:30:32
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 本科新能源科學(xué)與工程，一志愿華理能動285求調(diào)劑 +3 | AZMK 2026-03-28 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 346求調(diào)劑 一志愿070303有機化學(xué) +3 | 蘿卜燉青菜 2026-03-28 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 317求調(diào)劑 +6 | 十閑wx 2026-03-24 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +10 | jjjjjjjjjjl 2026-03-27 | 10/500 |
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +4 | Sanmu-124 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 07化學(xué)280分求調(diào)劑 +10 | 722865 2026-03-23 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +17 | 顧九笙要謙虛 2026-03-24 | 23/1150 |
|
|
|
[考研] 322求調(diào)劑 +4 | 我真的很想學(xué)習(xí) 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 298調(diào)劑 +3 | jiyingjie123 2026-03-27 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 292求調(diào)劑 +4 | 求求了收下我吧?/a> 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 329求調(diào)劑 +7 | 鈕恩雪 2026-03-25 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +8 | Auroracx 2026-03-22 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 086000生物與醫(yī)藥292求調(diào)劑 +6 | 小小陳小小 2026-03-22 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 263求調(diào)劑 +6 | yqdszhdap－ 2026-03-22 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)調(diào)劑一志愿上海交通大學(xué)336分-本科上海211 +4 | 小魚愛有機 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 303求調(diào)劑 +6 | 藍山月 2026-03-25 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 086003食品工程求調(diào)劑 +6 | 淼淼111 2026-03-24 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)調(diào)劑，求導(dǎo)師收 +7 | 天天好運來上岸?/a> 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 化工專碩求調(diào)劑 +3 | question挽風(fēng) 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 333求調(diào)劑 +3 | ALULU4408 2026-03-23 | 3/150 |
|