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1289622木蟲 (正式寫手)
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[求助]
求助血液樣品處理問題
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初次接觸血樣處理的實驗有許多問題不是很明白: 1、分離血漿時采集的血液要立即離心,還是靜置一會再離心?有時候采樣點不能一次性完成不會影響實驗吧?2、離心獲得的血漿要立即放入冰箱中嗎?由于采樣的時間跨度在7個小時,這樣之前分離的血漿要在室溫條件下至少放置7個小時(實驗的地方?jīng)]有冰箱),這樣可行嗎? 3、怎樣防止溶血現(xiàn)象?離心獲得的血漿都是紅色的,抽血時壓力不是很大,將血液推入離心管時動作也很緩和(針頭已經(jīng)拔掉),為什么還有溶血現(xiàn)象? 4、-20℃保存的血漿可以保存多久?血漿怎樣復(fù)溶?是放在室溫下自然融化,還是要在一定的水浴溫度下融化? 5、取空白血漿之前也要禁食嗎?為什么?禁食多久? 6、血漿和血清樣品必須要進行蛋白沉淀嗎?有的說液液萃取不必進行蛋白沉淀,這種說法正確嗎? 7、乙酸乙酯處理血漿,除能提取藥物外還能融入血漿中的什么成分?用它提取藥物,氮氣吹干后再復(fù)溶發(fā)現(xiàn)離心管底部有些東西溶解不了,復(fù)溶的液體有塊狀漂浮物,這種情況該怎么辦?會不會影響藥物的復(fù)溶效果? 8、分離血漿用的肝素鈉濃度一般是多大的?肝素鈉中的水分對血漿樣品有影響嗎,什么影響?粉末狀的肝素鈉怎么配成溶液? 9、走液相時,樣品的色譜峰不是較光滑的線條而是波浪形的線條,這是怎么回事?是柱子的問題嗎,怎樣解決? 10、冰凍的血漿樣品復(fù)溶后血漿里面有一些絮狀或是膠狀粘稠物質(zhì),請問這是什么物質(zhì)?取血漿的時候沒有取到那些粘稠物質(zhì),這會影響血漿藥物含量的測定嗎? [ Last edited by 1289622 on 2011-10-22 at 09:32 ] |
藥代動力學(xué)…… |
金蟲 (初入文壇)
金蟲 (初入文壇)
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好多。。。偶來一個個說說個人的經(jīng)驗吧 1 最好是采集后盡快離心,不過我加了抗凝劑 感覺過了十幾分鐘一批樣品全部出來再離心 也能很好的分離,個人覺得加了抗凝后只要注意不要大幅度晃動導(dǎo)致凝血就行。 2 當(dāng)然是盡快放入冰箱的 如果實驗室么有 就用個泡沫盒子 里面放個冰袋就行啊 低溫總是好的 能做到的就盡量做到嘛 雖然我有時候也來不及放冰箱 但也是盡快放入 3 我每次都是加了抗凝以后 全血在ep管里上下輕微顛倒下 都木有溶血 這個完全看你操作了吧 包括放入離心機前也不要大幅度晃動 4 -20℃感覺可以挺久的 我最長一次保存了2-3個月 仍然測定出來了 用的是自然解凍的 5 最好禁食 因為一是和實驗組平行 實驗組禁食的啊 2是防止食物中的個別成分影響 但覺得影響可以忽略 禁食一般實驗組是12-14個小時吧 自由飲水 6 當(dāng)然要沉淀蛋白啊 不然會對柱子很大損傷 加沉淀劑沉淀蛋白 和液液萃取 都是除去蛋白的過程 因為萃取的過程中 蛋白萃取不出來 所以這兩個選擇一個效率高的就行 7 還能融入神馬東西 這個偶還沒考慮過 但是肯定有一些雜質(zhì)在其中的,還有一些親脂的東東,吹干后復(fù)溶時加入溶劑后,充分渦旋混勻 然后離心取上清 就可以把雜質(zhì)除去 復(fù)溶后有雜質(zhì)很正常的 所以都要離心取上清 不用擔(dān)心 8 肝素鈉我們一般都是直接用毛細管挑一點放入子彈頭 然后彈開 感覺效果不錯 因為配了溶液還要吹干 感覺很麻煩 配成溶液后抗凝好像是1:50-100 濃度我等會查查其他帖子 很多人都寫過 9 你的不光滑是指神馬不光滑?基線還是? 是基線平穩(wěn)但是出峰不光滑?這個原因比較多 你詳細說下 而且是ms還是液相 10血漿中的一些纖維蛋白 可能還有其他蛋白成分 你把它挑開放在一邊 吸取液體的血漿 感覺影響不大 藥物分散在液體血漿中的 不過沒有影響也是不可能的 大家都有 也就平行了?呵呵 有什么情況在交流討論吧 |
木蟲 (正式寫手)
金蟲 (小有名氣)
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