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王玉民新蟲 (小有名氣)
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[求助]
求助：請問做TOPO克隆時總是連接不上怎么回事啊？
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請教高手： 我用Pfu酶擴(kuò)增得到大約500bp的片段，與TOPO載體連接時，連接轉(zhuǎn)化后總是不長斑是怎么回事��？ 有沒有做過TOPO克隆的有什么好的經(jīng)驗指導(dǎo)一下啊？ |
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2樓2011-10-11 09:58:25
王玉民
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3樓2011-10-11 10:18:05
yuxia82012
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【答案】應(yīng)助回帖
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TOPO vector 是invitrogen公司的一個TA克隆的質(zhì)粒載體系列。http://tools.invitrogen.com/content/sfs/manuals/topota_man.pdf Pfu酶是高保真酶，擴(kuò)增后不帶A的，所以你擴(kuò)增得到大約500bp的片段如果沒有經(jīng)過加A處理，是不能直接用于TOPO vector做TA克隆的。 |
5樓2011-10-11 14:47:04
xiaoshu8833
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