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王玉民新蟲(chóng) (小有名氣)
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[求助]
求助:請(qǐng)問(wèn)做TOPO克隆時(shí)總是連接不上怎么回事。
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請(qǐng)教高手: 我用Pfu酶擴(kuò)增得到大約500bp的片段,與TOPO載體連接時(shí),連接轉(zhuǎn)化后總是不長(zhǎng)斑是怎么回事。 有沒(méi)有做過(guò)TOPO克隆的有什么好的經(jīng)驗(yàn)指導(dǎo)一下啊? |

新蟲(chóng) (小有名氣)

木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)

至尊木蟲(chóng) (著名寫(xiě)手)
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TOPO vector 是invitrogen公司的一個(gè)TA克隆的質(zhì)粒載體系列。http://tools.invitrogen.com/content/sfs/manuals/topota_man.pdf Pfu酶是高保真酶,擴(kuò)增后不帶A的,所以你擴(kuò)增得到大約500bp的片段如果沒(méi)有經(jīng)過(guò)加A處理,是不能直接用于TOPO vector做TA克隆的。 |
鐵蟲(chóng) (初入文壇)

新蟲(chóng) (小有名氣)

鐵蟲(chóng) (初入文壇)

金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)

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