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bluysky0902金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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[求助]
PCR擴(kuò)增不出條帶
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模板:2個(gè)蓮霧品種, 品種a的檢測(cè)結(jié)果:含量908.1ng/µL, A260:18.161,A280:10.219,A260/A280=1.78,A260/A230=1.04 品種b的檢測(cè)結(jié)果:含量610.2ng/µL, A260:12.203,A280:6.807,A260/A280=1.79,A260/A230=1.18 PCR體系:模板的量60ng,其他反應(yīng)成分為標(biāo)準(zhǔn)加樣(成熟體系,其他樹(shù)種做沒(méi)有問(wèn)題) 引物:ISSR隨機(jī)引物(隨機(jī)用了10條) 結(jié)果:白板 原因:為什么????? 個(gè)人認(rèn)為是模板的問(wèn)題,因?yàn)橐郧暗臅r(shí)候,在其他個(gè)別品種(其他樹(shù)種)也有發(fā)生過(guò)類(lèi)似的情況,總是擴(kuò)不出來(lái),后來(lái)又把模板重新純化(Tris酚)了一遍才擴(kuò)出來(lái),但模板損失量會(huì)很大,這次就是想問(wèn)問(wèn)蟲(chóng)友們,到底是什么原因造成的?除純化之外,還有其他解決的方式嗎?唉,頭大。。。 |
【分子生物】EPI帖 | 核酸與基因生物學(xué) |
金蟲(chóng) (正式寫(xiě)手)
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