 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 5 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 3446 | 回復(fù): 2 | ||
| 本帖產(chǎn)生 1 個(gè) MicEPI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看 | ||
| 當(dāng)前只顯示滿足指定條件的回帖，點(diǎn)擊這里查看本話題的所有回帖 | ||
gytjyb新蟲 (小有名氣)
|
[求助]
培養(yǎng)大腸桿菌提取質(zhì)粒失敗。。。
|
|
|
我是個(gè)能有500個(gè)拷貝的質(zhì)粒。。轉(zhuǎn)到大腸桿菌中，培養(yǎng)渾濁（12小時(shí)）后提取，發(fā)現(xiàn)老是提取不出來，質(zhì)粒的濃度很低。我是加了卡那霉素。。�？鞘沁@個(gè)月內(nèi)按比例配的, 終濃度按質(zhì)粒說明書上是30微克/毫升的量。我做PCR卻能夠檢驗(yàn)我的菌中是轉(zhuǎn)染了目的質(zhì)粒的，就是提不出來，濃度低。 另外，我發(fā)現(xiàn)我培養(yǎng)的大腸桿菌，養(yǎng)時(shí)間久了，比如好幾天，會(huì)在LB液體培養(yǎng)基中會(huì)產(chǎn)生絮狀沉淀，這個(gè)正常嗎。。 最后一個(gè)問題，我發(fā)現(xiàn)，我轉(zhuǎn)化質(zhì)粒的菌，有的菌要3天才能在LB固體涂有卡那抗生素的培養(yǎng)基上長(zhǎng)出來，這個(gè)是真的嗎。 您有什么建議沒有，謝謝大家的幫助。。。感激不盡。。。 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
323求調(diào)劑
已經(jīng)有6人回復(fù)
-
一志愿北京化工大學(xué) 070300 學(xué)碩 336分 求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
352求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
一志愿東華大學(xué)化學(xué)070300，求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
277材料科學(xué)與工程080500求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
317求調(diào)劑
已經(jīng)有18人回復(fù)
-
293求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
280分求調(diào)劑 一志愿085802
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
0854電子信息求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
263求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 【資料】分子生物學(xué)常見問題解答
已經(jīng)有30人回復(fù)
- 質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 提取大腸桿菌質(zhì)粒失敗的原因
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】大腸桿菌轉(zhuǎn)化質(zhì)粒，出來的不是我要的了，怎么回事？
已經(jīng)有13人回復(fù)
- 【求助/交流】提取大腸桿菌質(zhì)粒時(shí)，所用的大腸桿菌菌液在4°C可以保存多長(zhǎng)時(shí)間?
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】大腸桿菌，農(nóng)桿菌質(zhì)粒
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 【求助/交流】釀酒酵母質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌
已經(jīng)有11人回復(fù)
- 微生物學(xué)考研資料1(沈萍版同步）免幣分享
已經(jīng)有67人回復(fù)
zc10052157
新蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 23 (小學(xué)生)
- 金幣: 431.3
- 紅花: 1
- 帖子: 325
- 在線: 142.3小時(shí)
- 蟲號(hào): 1014987
- 注冊(cè): 2010-05-10
- 性別: GG
- 專業(yè): 微生物生理與生物化學(xué)
3樓2011-10-18 11:01:04
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
scelab(金幣+5, MicEPI+1): 高手，謝謝回復(fù)哦~~~ 2011-10-17 23:54:44
scelab(金幣+5, MicEPI+1): 高手，謝謝回復(fù)哦~~~ 2011-10-17 23:54:44
| 這個(gè)質(zhì)粒是復(fù)制型質(zhì)粒嗎？你提取質(zhì)粒是通過試劑盒提的嗎，還是手提的呢，若是手提，會(huì)不會(huì)試劑問題，或是你的操作問題呢，破壁的時(shí)候有沒有完全啊等等。你培養(yǎng)的大腸桿菌時(shí)間久了，會(huì)不會(huì)產(chǎn)生菌膜了呢，所以產(chǎn)生絮狀沉淀啊，雖然沒見過普通的大腸桿菌能產(chǎn)生絮狀（沒有培養(yǎng)這么久過），但是某些革蘭氏陰性菌株經(jīng)常會(huì)產(chǎn)生菌膜的，不知道你的大腸是不是這個(gè)原因。雖然不知道卡那穩(wěn)不穩(wěn)定，但是像氨芐平板放置3天估計(jì)已經(jīng)沒用了，所以長(zhǎng)出的菌株的可能都是假陽(yáng)性，卡那抗性不是倒平板之前到的嗎，怎么會(huì)涂在表面呢。是不是真的，你可以挑些菌株做菌落PCR驗(yàn)證下嘛？如果這個(gè)質(zhì)粒有其他抗性，可以換著試試啊。 |
2樓2011-10-17 23:49:27
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 一志愿西安交通大學(xué)材料工程專業(yè) 282分求調(diào)劑 +11 | 楓橋ZL 2026-03-18 | 13/650 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 招08考數(shù)學(xué) +4 | laoshidan 2026-03-20 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 085600材料與化工306 +4 | z1z2z3879 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研]
 一志愿東華大學(xué)控制學(xué)碩320求調(diào)劑
+3
|
Grand777 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 311求調(diào)劑 +3 | 勇敢的小吳 2026-03-20 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 296求調(diào)劑 +4 | www_q 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 279分求調(diào)劑 一志愿211 +14 | chaojifeixia 2026-03-19 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 機(jī)械專碩299求調(diào)劑至材料 +3 | kkcoco25 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 初始318分求調(diào)劑（有工作經(jīng)驗(yàn)） +3 | 1911236844 2026-03-17 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 265求調(diào)劑 +9 | 梁梁校校 2026-03-17 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 一志愿華中科技大學(xué)，080502，354分求調(diào)劑 +5 | 守候夕陽(yáng)CF 2026-03-18 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿 西北大學(xué) ，070300化學(xué)學(xué)碩，總分287，雙非一本，求調(diào)劑。 +3 | 晨昏線與星海 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料專業(yè)求調(diào)劑 +6 | hanamiko 2026-03-18 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 274求調(diào)劑 +10 | S.H1 2026-03-18 | 10/500 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +3 | 阿姐阿姐家啊 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研]
材料與化工 322求調(diào)劑
+4
|
然11 2026-03-19 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 中南大學(xué)化學(xué)學(xué)碩337求調(diào)劑 +3 | niko- 2026-03-19 | 6/300 |
|
|
|
[考研]
 295復(fù)試調(diào)劑
+8
|
簡(jiǎn)木ChuFront 2026-03-19 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿吉林大學(xué)材料學(xué)碩321求調(diào)劑 +11 | Ymlll 2026-03-18 | 15/750 |
|
|
|
[考研] 288求調(diào)劑，一志愿華南理工大學(xué)071005 +5 | ioodiiij 2026-03-17 | 5/250 |
|