 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 查看: 1251 | 回復(fù): 11 | ||
木左左銀蟲 (正式寫手)
|
[求助]
PCR成這樣，求助！��！
|
|
公司做的cDNA，引物，然后是體系，程序自己做的，cDNA公司有沒有用內(nèi)參檢測(cè)我也不清楚，電泳圖下面有，引物一的Tm值64.13，二的Tm值63.95，目的片段GC含量高可以到60%，目的片段出多2300多bp，體系：buffer2.5mg2.0dntp2.0引物0.5酶0.3cDNA1.5和0.5兩個(gè)，程序95度10分鐘，94度45秒，63.5度45秒，72度90秒，15個(gè)循環(huán)；94度45秒，58.5度45秒72度45秒20個(gè)循環(huán)，72度10分鐘。大家給建議，看看我怎么修改體系和程序，才能有可能擴(kuò)出目的片段！謝謝 2000馬克 |
回復(fù)此樓» 猜你喜歡
086502化學(xué)工程342求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
材料求調(diào)劑一志愿哈工大324
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
328求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
-
340求調(diào)劑
已經(jīng)有5人回復(fù)
-
一志愿南昌大學(xué)324求調(diào)劑
已經(jīng)有4人回復(fù)
-
求調(diào)劑推薦 材料 304
已經(jīng)有15人回復(fù)
-
291求調(diào)劑
已經(jīng)有19人回復(fù)
-
331環(huán)境科學(xué)與工程求調(diào)劑
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
289求調(diào)劑
已經(jīng)有8人回復(fù)
-
315分求調(diào)劑
已經(jīng)有7人回復(fù)
» 本主題相關(guān)價(jià)值貼推薦，對(duì)您同樣有幫助:
- 求助從cif文件轉(zhuǎn)變成pcr文件（用于fullprof擬合）
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 求解釋！PCR產(chǎn)物在目的區(qū)有很亮的拖尾！需要回收目的片段！怎么辦啊?
已經(jīng)有22人回復(fù)
- 求助！關(guān)于RT-PCR的問(wèn)題！
已經(jīng)有20人回復(fù)
- SSR-PCR求助
已經(jīng)有21人回復(fù)
- 求助PCR老是跑不出條帶
已經(jīng)有16人回復(fù)
- ＲＴ－ＰＣＲ問(wèn)題求助
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 【求助/交流】SSR結(jié)果為什么跑成這樣，各位高手給指點(diǎn)一下
已經(jīng)有20人回復(fù)
- PCR求助
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】RNA提成這樣，實(shí)時(shí)定量PCR能用嗎？望指點(diǎn)
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助/交流】大家?guī)臀铱纯次业沫傊菆D怎么這樣啊
已經(jīng)有27人回復(fù)
- 【求助/交流】怎么條帶跑成這樣？？？求高人指教。。。
已經(jīng)有26人回復(fù)
- 【求助/交流】大家?guī)兔聪挛业腜CR電泳圖，急！做了7.8次還是這樣。
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 【求助/交流】RT-PCR不成功
已經(jīng)有25人回復(fù)
- 【求助/交流】進(jìn)行pcr克隆時(shí)，出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】有沒有人像我這樣PCR一會(huì)做的出來(lái)一會(huì)又做不出來(lái)的
已經(jīng)有16人回復(fù)
木左左
銀蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 436.7
- 散金: 70
- 帖子: 324
- 在線: 103.4小時(shí)
- 蟲號(hào): 1020700
- 注冊(cè): 2010-05-17
- 專業(yè): 基因表達(dá)調(diào)控與表觀遺傳學(xué)
2樓2011-10-21 11:07:27
jurkat.1640
至尊木蟲 (文壇精英)
- BioEPI: 2
- 應(yīng)助: 908 (博后)
- 金幣: 17175
- 散金: 1654
- 紅花: 121
- 沙發(fā): 41
- 帖子: 14525
- 在線: 2184.9小時(shí)
- 蟲號(hào): 514340
- 注冊(cè): 2008-02-28
- 性別: GG
- 專業(yè): 病毒學(xué)
3樓2011-10-21 22:48:54
木左左
銀蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 436.7
- 散金: 70
- 帖子: 324
- 在線: 103.4小時(shí)
- 蟲號(hào): 1020700
- 注冊(cè): 2010-05-17
- 專業(yè): 基因表達(dá)調(diào)控與表觀遺傳學(xué)
4樓2011-10-22 10:35:05
木左左
銀蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 436.7
- 散金: 70
- 帖子: 324
- 在線: 103.4小時(shí)
- 蟲號(hào): 1020700
- 注冊(cè): 2010-05-17
- 專業(yè): 基因表達(dá)調(diào)控與表觀遺傳學(xué)
5樓2011-10-22 12:02:19
doublehelix
木蟲 (著名寫手)
- BioEPI: 1
- 應(yīng)助: 16 (小學(xué)生)
- 金幣: 4035.7
- 散金: 666
- 紅花: 6
- 帖子: 1201
- 在線: 167小時(shí)
- 蟲號(hào): 79445
- 注冊(cè): 2005-07-10
- 專業(yè): 生物大分子結(jié)構(gòu)與功能
6樓2011-10-22 12:19:11
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★
adslye(金幣+2): 鼓勵(lì)交流！ 2011-10-23 15:13:47
木左左(金幣+2): 2011-11-12 22:40:54
adslye(金幣+2): 鼓勵(lì)交流！ 2011-10-23 15:13:47
木左左(金幣+2): 2011-11-12 22:40:54
|
你片段這么大，延伸時(shí)間太短了。一般情況是1kb/1min，你把延伸時(shí)間提到2min30s看看，還有你這個(gè)退火溫度我覺得57應(yīng)該可以吧，我有對(duì)引物Tm值是66，我59度P出來(lái)的。 程序：95度 4min （94度 40s，57度 50s ，72度 2min30s）35cycle 最后總延伸 72度 10min 你試試看可行。  |
7樓2011-10-22 12:51:26
木左左
銀蟲 (正式寫手)
- 應(yīng)助: 2 (幼兒園)
- 金幣: 436.7
- 散金: 70
- 帖子: 324
- 在線: 103.4小時(shí)
- 蟲號(hào): 1020700
- 注冊(cè): 2010-05-17
- 專業(yè): 基因表達(dá)調(diào)控與表觀遺傳學(xué)
8樓2011-10-22 15:49:53
★ ★
adslye(金幣+2): 說(shuō)明下原理可能更好，謝謝交流！ 2011-10-23 15:14:11
adslye(金幣+2): 說(shuō)明下原理可能更好，謝謝交流！ 2011-10-23 15:14:11
|
本帖內(nèi)容被屏蔽 |
9樓2011-10-22 21:40:47
yuzhiming
捐助貴賓 (知名作家)
- 應(yīng)助: 49 (小學(xué)生)
- 金幣: 18071.4
- 散金: 4225
- 紅花: 10
- 帖子: 7776
- 在線: 1218.1小時(shí)
- 蟲號(hào): 48471
- 注冊(cè): 2004-06-19
- 性別: GG
- 專業(yè): 植物學(xué)研究的新技術(shù)、新方
10樓2011-11-02 15:38:20
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 木左左 的主題更新
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 086502化學(xué)工程342求調(diào)劑 +4 | 阿姨復(fù)古不過(guò) 2026-03-27 | 4/200 |
|
|---|---|---|---|---|
|
|
[考研] 286求調(diào)劑 +3 | 丟掉懶惰 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[有機(jī)交流]
高溫高壓反應(yīng)求助
 10+4
|
chibby 2026-03-25 | 4/200 |
|
|
[考研] 0703化學(xué) +6 | 妮妮ninicgb 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 266分求材料化工冶金礦業(yè)等專業(yè)的調(diào)劑 +4 | 哇呼哼呼哼 2026-03-26 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 材料與化工085600，總分304，本科有兩篇sci參與，求調(diào)劑 +10 | 幸運(yùn)的醬醬 2026-03-22 | 12/600 |
|
|
|
[考研] 279 分 求調(diào)劑 +4 | 睡個(gè)好覺_16 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 085600，材料與化工321分調(diào)劑 +4 | 大饞小子 2026-03-27 | 6/300 |
|
|
|
[考研] 化學(xué)308分求調(diào)劑 +8 | 你好明天你好 2026-03-23 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 085601 材料工程 313分 求調(diào)劑 +5 | Ong3 2026-03-27 | 5/250 |
|
|
|
[論文投稿] Journal of Mechanical Science and Technology +3 | Russ_ss 2026-03-25 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 351求調(diào)劑 +4 | 麥克阿磊 2026-03-24 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 0703化學(xué)求調(diào)劑 +3 | 丹青奶蓋 2026-03-26 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 總分293求調(diào)劑 +6 | 加一一九 2026-03-25 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 290分調(diào)劑求助 +3 | 吉祥止止陳 2026-03-25 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 293求調(diào)劑 +7 | 加一一九 2026-03-24 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 0854電子信息求調(diào)劑 324 +4 | Promise-jyl 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 一志愿北化315 求調(diào)劑 +3 | akrrain 2026-03-24 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料/農(nóng)業(yè)專業(yè)，07/08開頭均可，過(guò)線就行 +3 | 呵唔哦豁 2026-03-23 | 4/200 |
|
|
|
[考研]
 一志愿東華大學(xué)化學(xué)070300，求調(diào)劑
+7
|
2117205181 2026-03-21 | 8/400 |
|