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yalan_p銀蟲 (小有名氣)
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原核表達(dá)蛋白誘導(dǎo)不出來(lái)
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最近用pGEX-4T-1構(gòu)建了一個(gè)融合蛋白的表達(dá)載體，測(cè)序結(jié)果顯示沒(méi)有出現(xiàn)堿基的位移和變異，但是做誘導(dǎo)的時(shí)候卻一直沒(méi)有目的蛋白，我的蛋白在23kD左右，GST標(biāo)簽為26kD，誘導(dǎo)后在50kD左右應(yīng)有比較亮的條帶，但是SDS電泳顯示30攝氏度誘導(dǎo)4h后的蛋白表達(dá)與對(duì)照是一樣的。上清和沉淀都分別做了電泳，都是一樣的結(jié)果。 請(qǐng)教高手，這種情況我該怎么辦？可能是什么原因？該如何進(jìn)一步優(yōu)化條件？ |
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