 |
 |
 |
 |
 |
 |
||
 |
 |
 |
 |
 |
| 4 | 1/1 | 返回列表 |
| 查看: 823 | 回復(fù): 3 | |||
| 本帖產(chǎn)生 1 個 MolEPI ，點(diǎn)擊這里進(jìn)行查看 | |||
donnafeng金蟲 (小有名氣)
|
[求助]
蛋白透析沉淀
|
||
|
預(yù)測的重組蛋白等電點(diǎn)是6.75 分子量約17kd 蛋白過ni柱后透析 用的是ph7.5的50mMtris-hcl緩沖液過夜 結(jié)果出現(xiàn)絮狀的沉淀 1.可能是等電點(diǎn)沉淀嗎？看見有人說要偏離等電點(diǎn)2-3個單位 是這樣的嗎 改成ph8.5的tris-hcl緩沖液會不會好點(diǎn)呢 2.有可能是聚合沉淀嗎 文獻(xiàn)報道這種蛋白可能是二聚體或者四聚體 會不會在透析的過程中2、4、6、8聚體一類的都可能形成啊 如果是應(yīng)該怎么處理 3.不用透析用柱層析來脫鹽行嗎 具體用什么柱子 什么條件來脫鹽 看見有人用g-25來做脫鹽柱 是不是不管多大的蛋白都可以用g-25脫鹽啊 脫鹽柱的原理是什么啊 |
回復(fù)此樓» 收錄本帖的淘帖專輯推薦
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜歡
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：實(shí)驗(yàn)器材的 “烏龍”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)中的趣事：和實(shí)驗(yàn)材料的 “斗智斗勇”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
化學(xué)工程及工業(yè)化學(xué)論文潤色/翻譯怎么收費(fèi)?
已經(jīng)有269人回復(fù)
-
蛋白質(zhì)檢測：精準(zhǔn)分析，解鎖生物分子的密碼
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之小鼠實(shí)驗(yàn)：嚴(yán)謹(jǐn)設(shè)計，解析生命機(jī)制的重要載體
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之重金屬檢測：精準(zhǔn)篩查，守護(hù)健康與環(huán)境的防線
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“蛙測重金屬我背鍋三千”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
不合理蛙科研實(shí)驗(yàn)之“鼠逃三次我發(fā)三篇SCI”
已經(jīng)有0人回復(fù)
-
納米粒度分析
已經(jīng)有3人回復(fù)
-
林科院林化所招收材料與化工專業(yè)碩士，坐標(biāo)南京
已經(jīng)有0人回復(fù)
» 本主題相關(guān)商家推薦: (我也要在這里推廣)
» 本主題相關(guān)價值貼推薦，對您同樣有幫助:
- 求助硫酸銨沉淀蛋白質(zhì)的問題
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 急問，關(guān)于透析
已經(jīng)有15人回復(fù)
- 蛋白經(jīng)透析袋透析后出現(xiàn)渾濁，急求高手幫忙~！
已經(jīng)有12人回復(fù)
- 蛋白包涵體透析后雜蛋白很多，請教原因
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 鎳柱純化蛋白透析出現(xiàn)大量沉淀，請教
已經(jīng)有18人回復(fù)
- 酶透析
已經(jīng)有5人回復(fù)
- 如何在沉淀過程中保護(hù)蛋白
已經(jīng)有10人回復(fù)
- 【求助/交流】蛋白純化中透析的問題�。�
已經(jīng)有9人回復(fù)
- 【求助/交流】蛋白質(zhì)等電點(diǎn)沉淀
已經(jīng)有6人回復(fù)
- 【求助/交流】鎳柱純化的蛋白保存在-20度一個星期，拿出來都是沉淀？？
已經(jīng)有19人回復(fù)
- 【求助/交流】蛋白純化后透析及濃縮問題
已經(jīng)有8人回復(fù)
- 【求助/交流】蛋白透析總是出現(xiàn)沉淀
已經(jīng)有9人回復(fù)
wolaiyefeng
鐵桿木蟲 (小有名氣)
- 應(yīng)助: 0 (幼兒園)
- 金幣: 6377
- 散金: 318
- 紅花: 3
- 帖子: 200
- 在線: 108.6小時
- 蟲號: 1270968
- 注冊: 2011-04-20
- 性別: GG
- 專業(yè): 動物系統(tǒng)及分類學(xué)
2樓2011-10-27 11:52:58
【答案】應(yīng)助回帖
★ ★ ★ ★ ★
amisking(金幣+5, MolEPI+1): 鼓勵應(yīng)助！ 2011-10-27 20:48:31
donnafeng(金幣+40): 謝謝 實(shí)驗(yàn)室只有superdex75了 可以用來脫鹽嗎 蛋白17kd左右 疏水聚合可以加表面活性劑一類的減少嗎 2011-10-28 10:11:57
donnafeng(金幣+10): 2011-10-28 22:24:13
amisking(金幣+5, MolEPI+1): 鼓勵應(yīng)助！ 2011-10-27 20:48:31
donnafeng(金幣+40): 謝謝 實(shí)驗(yàn)室只有superdex75了 可以用來脫鹽嗎 蛋白17kd左右 疏水聚合可以加表面活性劑一類的減少嗎 2011-10-28 10:11:57
donnafeng(金幣+10): 2011-10-28 22:24:13
|
1.可能是等電點(diǎn)沉淀嗎？看見有人說要偏離等電點(diǎn)2-3個單位 是這樣的嗎 改成ph8.5的tris-hcl緩沖液會不會好點(diǎn)呢 蛋白質(zhì)帶電荷的基團(tuán)較多，pH酯有點(diǎn)影響，不會這么大吧！改變pH估計會有點(diǎn)效果，不會太大！ 2.有可能是聚合沉淀嗎 文獻(xiàn)報道這種蛋白可能是二聚體或者四聚體 會不會在透析的過程中2、4、6、8聚體一類的都可能形成啊 如果是應(yīng)該怎么處理 你看文獻(xiàn)有研究和你類似的蛋白質(zhì)沒，有的話他們那些是否有聚合性質(zhì)呢，。如果同類蛋白質(zhì)多具有聚合性質(zhì)，那估計你的蛋白質(zhì)也具有這一性質(zhì)。那可以考慮兩個方面，一是加入電解質(zhì)（也就是無機(jī)鹽）減小聚合趨勢（因電荷作用引起的）；另一個是疏水性作用引起的聚合，這個不太好辦了！ 3.不用透析用柱層析來脫鹽行嗎 具體用什么柱子 什么條件來脫鹽 看見有人用g-25來做脫鹽柱 是不是不管多大的蛋白都可以用g-25脫鹽啊 脫鹽柱的原理是什么啊 脫鹽柱也可以，我用過G-25，原理就是無機(jī)小分子可以進(jìn)入樹脂的小孔內(nèi)，在柱子經(jīng)過的路徑長，二蛋白質(zhì)大分子則不能進(jìn)入樹脂內(nèi)部，經(jīng)由樹脂間隙流出，由于兩類物質(zhì)所經(jīng)歷的途徑長短不同，實(shí)現(xiàn)分離！ 你觀察到底聚合估計是由于溶液中的鹽分減少，蛋白質(zhì)間帶不同電荷的基團(tuán)相互吸引引起蛋白質(zhì)分子沉降。 |
3樓2011-10-27 14:23:08
4樓2011-10-28 14:03:09
相關(guān)版塊跳轉(zhuǎn)
我要訂閱樓主 donnafeng 的主題更新
| 4 | 1/1 | 返回列表 |
| 最具人氣熱帖推薦 [查看全部] | 作者 | 回/看 | 最后發(fā)表 | |
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 318求調(diào)劑 +3 | plum李子 2026-03-21 | 6/300 |
|
|---|---|---|---|---|
|
[考研] 0856材料專碩353求調(diào)劑 +4 | NIFFFfff 2026-03-20 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 考研調(diào)劑 +3 | 呼呼？~+123456 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料與化工（0856）304求B區(qū)調(diào)劑 +3 | 邱gl 2026-03-20 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 工科0856求調(diào)劑 +3 | 沐析汀汀 2026-03-21 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料學(xué)碩333求調(diào)劑 +3 | 北道巷 2026-03-18 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 求調(diào)劑 +3 | .m.. 2026-03-21 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 310求調(diào)劑 +3 | baibai1314 2026-03-16 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 一志愿華中科技大學(xué)，080502，354分求調(diào)劑 +5 | 守候夕陽CF 2026-03-18 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 一志愿武理材料305分求調(diào)劑 +6 | 想上岸的鯉魚 2026-03-18 | 7/350 |
|
|
|
[考研] 一志愿中海洋材料工程專碩330分求調(diào)劑 +8 | 小材化本科 2026-03-18 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 一志愿武漢理工材料工程專碩調(diào)劑 +9 | Doleres 2026-03-19 | 9/450 |
|
|
|
[考研] 287求調(diào)劑 +7 | 晨昏線與星海 2026-03-19 | 8/400 |
|
|
|
[考研] 藥學(xué)383 求調(diào)劑 +3 | 藥學(xué)chy 2026-03-15 | 5/250 |
|
|
|
[考研] 0817 化學(xué)工程 299分求調(diào)劑 有科研經(jīng)歷 有二區(qū)文章 +22 | rare12345 2026-03-18 | 22/1100 |
|
|
|
[考研] 一志愿中國海洋大學(xué)，生物學(xué)，301分，求調(diào)劑 +5 | 1孫悟空 2026-03-17 | 6/300 |
|
|
|
[考博] 申博26年 +3 | 八6八68 2026-03-19 | 3/150 |
|
|
|
[考研] 材料專碩306英一數(shù)二 +10 | z1z2z3879 2026-03-16 | 13/650 |
|
|
|
[考研] 308求調(diào)劑 +4 | 是Lupa啊 2026-03-16 | 4/200 |
|
|
|
[考研] 275求調(diào)劑 +4 | 太陽花天天開心 2026-03-16 | 4/200 |
|